脂肪細(xì)胞GGPPS特異性缺失對(duì)脂肪因子分泌的影響.pdf

1、脂肪組織是一個(gè)與機(jī)體能量調(diào)控相關(guān)的內(nèi)分泌器官，脂肪組織所分泌的脂肪因子與機(jī)體中許多代謝進(jìn)程的調(diào)控密切相關(guān)，而脂肪因子作為大分子物質(zhì)它的運(yùn)輸需要借助于囊泡運(yùn)輸體系。
　　甲羥戊酸途徑的中間產(chǎn)物異戊二烯化基團(tuán)可用于參與囊泡運(yùn)輸?shù)男蛋白的翻譯后修飾。這些小G蛋白與細(xì)胞內(nèi)大分子物質(zhì)的囊泡運(yùn)輸密切相關(guān)，并且這些異戊二烯化基團(tuán)對(duì)于體內(nèi)的細(xì)胞生長(zhǎng)/分化，基因的表達(dá)以及蛋白的糖基化十分重要。GGPPS(Geranylgeranyl bispho

2、sphate synthase)是甲羥戊酸途徑中調(diào)控異戊二烯化的關(guān)鍵酶，它調(diào)控異戊二烯化基團(tuán)的產(chǎn)生從而與參與囊泡運(yùn)輸?shù)男蛋白的翻譯后修飾密切相關(guān)，而脂肪組織所分泌的脂肪因子的運(yùn)輸主要依賴于機(jī)體中的囊泡運(yùn)輸體系。此外，GGPP是機(jī)體中輔酶Q合成的原料，而輔酶Q是機(jī)體電子傳遞鏈中的重要組成部分，與機(jī)體的能量代謝密切相關(guān)。
　　利用loxp/Cre重組酶系統(tǒng)，選擇基因組同時(shí)具有Loxp位點(diǎn)和GGPPS基因的Ggpps-floxed小鼠

3、和帶有脂肪細(xì)胞特異性啟動(dòng)子aP2的Cre小鼠aP2-Cre進(jìn)行雜交以獲得脂肪組織GGPPS特異性缺失的小鼠GGPPS-/-。通過DNA電泳確定該小鼠的基因組中同時(shí)具有Loxp位點(diǎn)和Cre基因。通過多組織的RT-PCR以及Western blot確認(rèn)得到的小鼠模型其脂肪組織GGPPS缺失而其他組織GGPPS表達(dá)正常。構(gòu)建脂肪組織GGPPS特異性缺失的小鼠模型為研究GGPPS與脂肪細(xì)胞生物信號(hào)調(diào)控的關(guān)系奠定了基礎(chǔ)。將5周齡GGPPS+/+的

4、小鼠和GGPPS-/-的小鼠分別喂以繁殖飼料和高脂飼料12周，發(fā)現(xiàn)脂肪組織GGPPS缺失后小鼠的體重增加，皮下脂肪組織，附睪脂肪組織以及肝臟的重量增加。并且GGPPS在脂肪組織的缺失會(huì)造成系統(tǒng)的胰島素敏感性和葡萄糖耐受性降低。在高脂飲食喂養(yǎng)條件下與GGPPS+/+的小鼠相比，GGPPS-/-的小鼠的能量代謝顯著降低。之后對(duì)小鼠的炎性狀態(tài)進(jìn)行考察，結(jié)果顯示脂肪組織GGPPS特異性缺失的小鼠其脂肪組織中炎性細(xì)胞浸潤(rùn)增強(qiáng)，血清中炎性因子的表達(dá)