TRIM22對(duì)LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞促炎細(xì)胞因子的負(fù)向調(diào)節(jié)作用.pdf

1、TRIM(tripartite-motif protein，TRIM)家族因具有RBCC結(jié)構(gòu)而得名，RBCC結(jié)構(gòu)有三部分組成，RING結(jié)構(gòu)域、B-box結(jié)構(gòu)域和Coiled-coil結(jié)構(gòu)域。已知人的TRIM家族有70多個(gè)成員，具有重要的抗病毒作用，并參與細(xì)胞的增值、分化、腫瘤發(fā)生、凋亡及轉(zhuǎn)錄等方面的調(diào)節(jié)。
　　 LPS是G-桿菌細(xì)胞壁的重要成分之一，是主要的Toll樣受體4(Trolllike receptor4，TLR4)的激

2、動(dòng)劑[5]。TLR4結(jié)合LPS后，經(jīng)過(guò)一系列的信號(hào)傳遞可以激活關(guān)鍵位點(diǎn)TAK1，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子NFKB的活化，誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生。而接頭蛋白TAB2和TAB3在LPS激活TAK1的信號(hào)通路中具有重要的銜接作用。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，小鼠TRIM30α可以降解TAB2和TAB3，抑制轉(zhuǎn)錄因子NFκB的活化，減少LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生，在LPS耐受中發(fā)揮重要的作用[9]。TRIM30α的表達(dá)有種屬特異性，人的基因組中并不存在T

3、RIM30α，在眾多人TRIM家族中是否有成員類似與TRIM30α的生物學(xué)功能，目前尚不清楚。通過(guò)生物信息學(xué)分析，我們發(fā)現(xiàn)TRIM22與TRIM30α的核酸序列有較高的同源性，為61.32％。在Hela細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞及單核巨噬細(xì)胞受LPS或干擾素刺激后，均可誘導(dǎo)TRIM22的表達(dá)。在此基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步深入探討TRIM22是否具有類似于TRIM30α降解TAB2和TAB3的作用，以及對(duì)LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子的影響，并獲得以下

4、發(fā)現(xiàn)：
　　 1.TRIM22與TAB2存在內(nèi)源性和外源性相互作用。過(guò)表達(dá)TRIM22能降低TAB2的表達(dá)，而另一個(gè)同源物TRIM5α對(duì)TAB2的效果不明顯。TRIM22對(duì)TAB2和TAB3的降解作用呈劑量依賴性。
　　 2.TRIM22可以通過(guò)溶酶體途徑降解TAB2，并且其SPRY結(jié)構(gòu)域在降解過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
　　 3.雙熒光素酶檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，TRIM22呈劑量依賴性的抑制TAB2或TAB3誘導(dǎo)的NFκB報(bào)告基

5、因活化。在U937細(xì)胞分化的巨噬細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染TRIM22特異性siRNA，并用IFNα預(yù)處理，LPS刺激巨噬細(xì)胞時(shí)，“沉默”TRIM22組TNFα和IL6的產(chǎn)生明顯高于對(duì)照組。相反，通過(guò)MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒系統(tǒng)，在U937單核細(xì)胞株中過(guò)表達(dá)TRIM22。在LPS刺激時(shí)，高表達(dá)TRIM22組TNFα和IL6的產(chǎn)生明顯少于對(duì)照組。
　　 綜合以上研究結(jié)果說(shuō)明，TRIM22能通過(guò)溶酶體途徑降解TAB2和TAB3，負(fù)向調(diào)控LPS誘導(dǎo)的NF