SELDI-TOF-MS篩選差異蛋白在肺部良惡性疾病鑒別及臨床決策中的研究.pdf

1、背景：肺癌是人類最為常見的惡性腫瘤，近年來發(fā)病率逐年上升。盡管隨著醫(yī)療手段的不斷提高，肺癌患者早期診斷以及預(yù)后在不斷改善，但是相對于其他腫瘤而言，肺癌的預(yù)后仍舊較差，總體5年生存率在美國約15％，在歐洲約10％，在發(fā)展中國家大約8.9％。肺癌容易發(fā)生轉(zhuǎn)移和局部外侵，目前而言缺少有效的早期診斷方法，而患者的預(yù)后與腫瘤的分期密切相關(guān)，對于腫瘤局限的患者5年生存率在49.5％，對于局部外侵或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例5年生存率為20.6％，對于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)

2、移的患者5年生存率僅為2.8％。因此，如何能夠?qū)Ψ伟┳龀鰷?zhǔn)確的早期診斷已經(jīng)成為影響肺癌治療效果的重要因素。本研究利用SELDI-TOF-MS技術(shù)對肺部良惡性疾病的蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行分析，尋找肺癌特異性的蛋白質(zhì)表達(dá)，以期為肺癌的早期診斷提供一定幫助。另外我們對不同臨床病理特征的肺癌組別進(jìn)行差異蛋白質(zhì)表達(dá)的分析，以期尋找影響肺癌疾病進(jìn)展和分期某些重要的蛋白質(zhì)并且建立臨床決策模型以希望為臨床肺癌的診治提供幫助。
　　 第一部分蛋白質(zhì)芯片S

3、ELDI-TOF-MS技術(shù)平臺建立
　　 目的：建立蛋白質(zhì)芯片SELDI-TOF-MS技術(shù)平臺，對其可靠性進(jìn)行確認(rèn)。
　　 材料和方法：對同一血漿樣品在6個不同芯片位點進(jìn)行蛋白質(zhì)指紋圖譜檢測，分析隨機(jī)選取的蛋白質(zhì)峰質(zhì)荷比及峰強(qiáng)度的變異系數(shù)(CV)。
　　 結(jié)果：同一血漿樣品在6個不同芯片位點的質(zhì)荷比(M/Z)CV值為4.88E-04(<1‰)，同一血漿樣品在6個不同芯片位點的質(zhì)荷比(M/Z)強(qiáng)度的CV值為0.12

4、(<0.2)。
　　 結(jié)論：:SELDI-TOF-MS是重復(fù)性較好、較為可靠的蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)。
　　 笫二部分肺癌患者不同臨床病理特征間蛋白質(zhì)指紋圖譜的比較
　　 目的：通過測定肺癌患者血漿蛋白表達(dá)情況，篩選出與疾病診斷、分期和其它臨床病理特征相關(guān)的差異蛋白。
　　 材料和方法：應(yīng)用表面增強(qiáng)激光解吸電離-飛行時間，質(zhì)潛技術(shù)(SELDI-TOF-MS)測定108例肺腺癌、26例肺部良性疾病，分析與疾病的

5、診斷、分期相關(guān)的差異蛋白表達(dá)。肺癌的分期為UICC/AJCC于2002年聯(lián)合制定的第六版肺癌TMN國際分期。
　　 結(jié)果：1．對肺癌患者和肺部良性疾病的血漿蛋白質(zhì)指紋圖譜進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)11個M/Z位點蛋白質(zhì)表達(dá)存在顯著差異(P<0.05)，其中1450.24、1471.95、6794.65、8289.41、8381.62、14374.77位點的蛋白質(zhì)表達(dá)強(qiáng)度在肺癌血漿中顯著增高；7617.22、11457.74、15590.

6、85、15813.76及22938.34位點的蛋白質(zhì)表達(dá)強(qiáng)度在肺癌血漿中顯著降低。
　　 2．對于I期肺癌、肺部良性疾病的血漿蛋白質(zhì)指紋圖譜分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)43個M/Z位點蛋白質(zhì)表達(dá)存在顯著差異(P<0.05)，其中1411.4、1447.63、1471.95、1479.1、1496.96、1520.47、1548、1564.67、1641.54、2803.03、2841.1、4768.71、6802.1、7005.24、8181

7、.59、8289.41、9573、9754.75、12054.43、14184.82、14374.77、16454.35、16678.98、22938.34、24283.03、24602.05、29125.61位點的蛋白質(zhì)表達(dá)強(qiáng)度在肺癌血漿中顯著增高；1217.46、2696.98、4874.59、6311.76、6520.82、7617.22、7983.73、8524.95、8788.99、9045.58、9176.61、11457.

8、74、13483.64、15589.4、15813.76、27561.76位點的蛋白質(zhì)表達(dá)強(qiáng)度在肺癌血漿中顯著降低。
　　 3．對108例肺癌患者的血漿蛋白質(zhì)指紋圖譜進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在不同病理分期的患者血漿中有40個差異的蛋白質(zhì)峰(P<0.05)。其中隨著病期增加1203.76、1223.51、2695.20、4873.45、5181.75、6315.51、6350.75、6516.06、7627.34、8386.03,853

9、0.45、8776.55、9045.58、9165.15、11456.55、13481.16、14840.41、15604.89、15836.05、22961.58及27548.47位點的蛋白質(zhì)強(qiáng)度有升高趨勢；1411.40、1450.24、1471.95、1479.10、2803.03、2841.10、6441.20、6576.90、8289.41、8918.22、、9573.00、9772.02、14184.82、14374.77、