SELDI-TOF-MS技術(shù)檢測腹腔熱灌注化療治療惡性腹水的機(jī)制.pdf

1、惡性腹水是腹腔惡性腫瘤晚期的常見的并發(fā)癥，是降低患者生活質(zhì)量的主要因素之一，腹水所致的腹脹、腹痛嚴(yán)重影響著患者的生存質(zhì)量，臨床治療困難。
　　 腹腔熱灌注化療（ Continuous Hyperthermic Intraperitoneal PerfusionChemotherapy，CHIPC）治療惡性腹水有明顯的優(yōu)勢，用于惡性腹水的治療已取得了很好的的成效，但目前對腹腔熱灌注化療治療惡性腹水的機(jī)制缺乏了解。
　　 本

2、課題擬應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)檢測胃癌并惡性腹水患者腹腔熱灌注化療治療前后血清、腹水中蛋白質(zhì)圖譜的差異，分析胃癌并惡性腹水患者腹腔熱灌注化療治療前后血清、腹水中差異蛋白，并將差異蛋白放入匹茲堡大學(xué)生物醫(yī)學(xué)信息學(xué)系蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)庫(EPO-KB)中，根據(jù)m/z 值對兩組均高表達(dá)的差異蛋白進(jìn)行檢索，以探討CHIPC治療惡性腹水的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　 材料和方法：
　　 1.病例和對照組選擇：
　　 廣州

3、醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院2008年10月至2009年3月收治的的胃癌并大量腹水患者8例，CHPPC治療后腹水全部消失，臨床療效評價(jià)為完全緩解。
　　 2.SELDI-TOF-MS檢測：
　　 經(jīng)過處理將血清、腹水樣本加到WCX2的芯片上，應(yīng)用Protein Chip Software3.1和Biomarker Wizard(BMW)軟件，根據(jù)方差分析原理計(jì)算CHIPC 治療惡性腹水前后患者血清相同質(zhì)荷比的蛋白質(zhì)峰值表達(dá)差異的P

4、 值。根據(jù)P 值的大小可比較每一個(gè)質(zhì)荷比峰在兩樣本中表達(dá)差異的顯著性程度，P 值越小說明該質(zhì)荷比峰對區(qū)分兩類樣本越有意義。1) 血清中，灌注前/灌注后波峰強(qiáng)度之間的比較采用t 檢驗(yàn)，P<0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2) 腹水中，灌注前/灌注后波峰強(qiáng)度之間的比較采用t 檢驗(yàn)，P<0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3) 根據(jù)檢測得到兩組均高表達(dá)差異蛋白，通過匹茲堡大學(xué)生物醫(yī)學(xué)信息學(xué)系已建立蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)庫(EP

5、O-KB)，可直接根據(jù)m/z完成對差異蛋白質(zhì)的檢索。從而分析相關(guān)目標(biāo)蛋白在CHPPC治療惡性腹水中的意義。
　　 結(jié)果：
　　 1) SELDI-TOF-MS 檢測共發(fā)現(xiàn)血清中有效蛋白峰83個(gè)；SELDI-TOF-MS 檢測共發(fā)現(xiàn)腹水中有效蛋白峰74個(gè)。
　　 2) SELDI-TOF-MS 檢測發(fā)現(xiàn)的血清中和腹水中的有效蛋白峰有一定的重疊性。
　　 3) CHIPC 治療惡性腹水患者血清中，灌注前8例對

6、灌注后8例，共發(fā)現(xiàn)P＜0.05的差異蛋白22個(gè)。
　　 4) CHIPC 治療惡性腹水患者腹水中，灌注前8例對灌注后8例，共發(fā)現(xiàn)P＜0.05差異蛋白20個(gè)。
　　 5) 血清中和腹水中，灌注前/灌注后差異表達(dá)的蛋白質(zhì)譜有以下差異蛋白在兩組中均出現(xiàn)高表達(dá)，質(zhì)/荷（m/z）值分別為：5582.36Da，3448.56Da，4418.04Da，7767.61Da，11661.53Da，3378.49Da和8604.72Da。<

7、br>　　 6) 在蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)庫(EPO-KB)檢索上述分子量的差異蛋白，檢測出m/z值為7767.61Da的目標(biāo)蛋白與血小板因子4（PF4）相吻合，其余6個(gè)差異蛋白則未能檢索到與之吻合的目標(biāo)蛋白。
　　 結(jié)論：
　　 1) 與治療前相比，CHIPC治療后，惡性腹水患者的血清和腹水中相關(guān)的蛋白質(zhì)表達(dá)水平均有顯著性的變化。
　　 2) 與治療前相比，CHIPC治療后，血清和腹水中部分差異蛋白峰的具有高度重