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文檔簡介
1、miRNAs是一類大小約22個核苷酸(nts)的內源性非編碼小RNAs,通過與mRNA3'UTR完全或不完全互補結合降解靶mRNAs或抑制其翻譯,參與細胞增殖、分化、代謝和凋亡等過程。前期研究發(fā)現(xiàn)miR-29c在胃癌中的表達量明顯下降,并預測抗凋亡基因Mcl-1為miR-29的靶基因之一,其在胃癌組織中高表達并與miR-29e的表達呈反比相關。
本研究構建相關載體并應用熒光素酶報告基因技術進一步證實miR-29b/c與Mc
2、l-1靶向作用關系。用Western blot檢測10例胃癌組織中Mcl-1蛋白表達情況。通過細胞轉染,在胃癌細胞BGC-823中高表達miR-29b/c,用實時定量PCR及Westernblot分別檢測Mcl-1 mRNA和Mcl-1蛋白的表達變化,并采用WTT試驗,DAPI染色,流式細胞術檢測其對細胞增殖、凋亡、細胞周期和藥物敏感性的影響。
結果發(fā)現(xiàn),胃癌組織中Mcl-1蛋白表達下降,miR-29b/c可以通過直接作用
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