心理應(yīng)激誘發(fā)抑郁大鼠前額葉皮質(zhì)DRD1-DRD5,DAT表達(dá)的mi-RNA調(diào)控機(jī)制.pdf

1、目的:研究早期母愛剝奪應(yīng)激和成年慢性不可預(yù)知性應(yīng)激對(duì)SD大鼠行為、前額葉皮質(zhì)DRD1-DRD5mRNA，DATmRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)的影響及mi-RNA的調(diào)控機(jī)制。
　　方法:將新生SD雄性大鼠隨機(jī)分為母愛剝奪應(yīng)激組(MD)、慢性不可預(yù)知性應(yīng)激組(CUS)和正常對(duì)照組(C)。MD組大鼠接受母愛剝奪應(yīng)激，CUS組大鼠在成年后接受慢性不可預(yù)知性應(yīng)激，對(duì)照組不接受任何實(shí)驗(yàn)處理。采用強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、糖水偏愛實(shí)驗(yàn)和曠場(chǎng)試驗(yàn)評(píng)估大鼠焦慮、抑郁樣行

2、為。采用實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)前額葉皮質(zhì)內(nèi)DRD1-DRD5, DATmRNA和miR-16、miR-200a、miR-207、miR-22、miR-122、miR-96的表達(dá)水平;采用免疫印跡法檢測(cè)前額葉皮質(zhì)DRD1-DRD5，DAT蛋白質(zhì)表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1.行為學(xué)結(jié)果:與對(duì)照組比較，MD及CUS組大鼠靜止漂浮時(shí)間增加，糖水偏愛率降低，直立次數(shù)減少、大便顆粒數(shù)增加;與CUS組比，MD組大鼠靜止漂浮時(shí)間長(zhǎng)，糖水偏愛率降低。2

3、.蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果:與C組比較，MD組的DRD1、DRD5、DRD3、DRD4、DAT及CUS組的DRD1、DRD5、DAT、DRD2蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)。與CUS組比較，DRD5蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)，D2樣受體及DAT蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)。3.基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果:與C組比較，MD組DRD1、DRD5mRNA、DRD3、DRD4、DATmRNA及CUS組的DRD1、DRD5、DRD2、DATmRNA表達(dá)上調(diào)，與CUS比較，D1樣受體、D2樣受體及DAT蛋白

4、質(zhì)表達(dá)上調(diào)。4.mi-RNA表達(dá)檢測(cè)結(jié)果:與C組比較，MD組的miR-207，miR-96的表達(dá)降低，CUS組的miR-122、miR-22，miR-207表達(dá)增加。miR-22、miR-122、miR-96表達(dá)水平分別與DRD4、DRD5、DAT蛋白表達(dá)水平明顯相關(guān)。5.生物學(xué)指標(biāo)與行為學(xué)指標(biāo)相關(guān)結(jié)果:DRD1蛋白表達(dá)水平與糖水偏愛率相關(guān)顯著;DRD1、DRD5，DAT蛋白表達(dá)水平與靜止漂浮時(shí)間明顯相關(guān);DRD5、DAT與直立次數(shù)相關(guān)