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文檔簡介
1、 目的:
研究紫杉醇對小鼠T細胞生物學(xué)行為及異基因小鼠皮膚移植排斥的影響,尤其是其潛在的分子機理,為新型免疫抑制劑的開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。
方法:
利用熒光標(biāo)記抗體、CFDA-SE染色、PI溶液、Annexin V及PI雙染,結(jié)合流式細胞術(shù)檢測紫杉醇對多克隆刺激劑ConA或(PDB不+/+Ion)作用下,小鼠T細胞活化、增殖、細胞周期及凋亡行為的影響;建立同種異基因小鼠皮膚移植模型,觀察紫杉醇對皮片存活期的影
2、響,~3H-TdR檢測混合淋巴細胞反應(yīng),三色熒光標(biāo)記檢測CD4~+CD25~+Tr,luminex檢測細胞因子,單色熒光標(biāo)記檢測嵌合體。
結(jié)果:
1、在ConA或(PDB不+/+Ion)刺激下,PTX各組對T細胞CD69表達均無抑制作用,而對CD25表達均有抑制作用(P<;0.01),且呈劑量依賴關(guān)系;對T細胞增殖呈劑量依賴關(guān)系抑制(P<;0.01),該抑制作用與小劑量CsA協(xié)同,刺激初立即或是24h后加入P
3、TX,抑制T細胞增殖作用無差異性(P>;0.05);阻滯活化淋巴細胞于G2/M期,且呈劑量依賴性(P<;0.01);誘導(dǎo)活化T細胞凋亡,并呈時間和劑量依賴性(P<;0.01),不誘導(dǎo)靜息T細胞凋亡。
2、PTX的免疫抑制作用能延長同種異基因小鼠移植皮片存活時間,與小劑量CsA有明顯協(xié)同作用(P<;0.01);高劑量PTX組升高CD4~+CD25~+Tr(P<;0.01),低劑量PTX與低劑量CsA聯(lián)用組協(xié)同
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