免疫細胞化學的方法在結(jié)腦早期診斷中的價值的研究.pdf

1、目的：結(jié)核性腦膜炎(tuberculosismeningitisTBM簡稱“結(jié)腦”)是常見的由結(jié)核桿菌侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成的感染性疾病，如果沒有得到及時治療，可造成嚴重和致命的后果，致殘率和致死率很高。由于結(jié)腦是一種能治愈的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，在早期階段進行特異性的治療是非常有效的，所以其預后的關(guān)鍵在于早期診斷、及時治療。作為微生物侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)導致的感染性疾病，找到病原體是診斷疾病的標準，所以結(jié)腦診斷的金標準是腦脊液(cereb

2、rospinalfluidCSF)中發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌[1]。但結(jié)腦患者腦脊液的涂片抗酸染色陽性率很低，約為10％，而結(jié)核菌培養(yǎng)所需時間較長(1～2月)，且陽性率僅20-30％[2]。我們臨床醫(yī)生亟待尋找一種快速、可靠的診斷結(jié)核性腦膜炎的方法以便可以早期診斷，及時治療。本研究對結(jié)腦組，對照組進行腦脊液常規(guī)檢查和選用免疫細胞化學的方法對腦脊液單核細胞內(nèi)的結(jié)核桿菌抗原進行檢測，以期找到一種簡單、快速、確診結(jié)腦的新方法，并對結(jié)腦的發(fā)病機制有所探討。

3、 方法：實驗組為35例結(jié)腦病人，均為臨床上診斷為結(jié)腦的住院病人，入選標準參考Ahuja[3]的臨床診斷標準，其中女15例，男20例，年齡2～65歲，平均33±15.5歲。對照組病人35例，為其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者：參考人民衛(wèi)生出版社第四版神經(jīng)病學教科書[4]相應診斷標準入選，男16例，女19例，年齡6～75歲，平均33.3±16.6歲。所有病例入院后24～48小時內(nèi)行腰穿，進行腦脊液常規(guī)、生化、細胞學染色以及墨汁染色、阿利新蘭染色

4、檢查。留取兩張以上腦脊液離心細胞涂片進行免疫細胞化學染色。 結(jié)果1.腦脊液常規(guī)檢查結(jié)果：35例TBM患者的腦脊液生化顯示為：蛋白升高的34例(0.36～3.63g/l)，1例蛋白正常(0.18g/l)；糖濃度降低的35例(0.01～3.7mmol/1)：氯化物降低的34例(91.8～128.3mmol/1)，氯化物正常的1例(131.4mmol/l)。細胞數(shù)0～1050個/mm3。2.腦脊液細胞學表現(xiàn)：結(jié)腦組腦脊液呈混合性細胞反

5、應的28例，其中以淋巴細胞為主的混合細胞反應14例，以嗜中性粒細胞為主的混合細胞反應9例，單純混合型細胞反應的5例，淋巴樣細胞學反應3例。阿利新蘭和墨汁染色均陰性。對照組腦脊液中以淋巴樣細胞反應為主有14例。5例化腦患者呈嗜中性粒細胞反應。3例隱球菌腦膜炎患者CSF中可見隱球菌，阿利新蘭染色和墨汁染色均陽性，腦囊蟲患者顯示嗜酸性粒細胞增加。3.免疫細胞化學染色結(jié)果：早期即可在腦脊液涂片上完整的單核樣細胞的胞漿內(nèi)檢測到結(jié)核桿菌的抗原，在我

6、們的免疫細胞學染色中顯現(xiàn)為棕紅色的微粒，且細胞核周圍染色較深，細胞核不被染色。80％左右的單核樣細胞有陽性的顯色，且多次檢測可持續(xù)陽性。在35例結(jié)腦患者中30例顯示陽性，敏感性為85.7％，發(fā)病≤14天者17例陽性，占94.44％，15～30天者10例陽性，占83.33％，＞30天者3例陽性，占60％。對照組無一例陽性，特異性為100％。比較腦脊液細胞學與抗原檢測顯示，以嗜中性粒細胞為主的混合型細胞反應11例，抗原檢測11例陽性，以淋巴

7、細胞為主的混合型細胞反應15例，抗原檢測14例陽性，單純混合型細胞反應6例，抗原檢測4例陽性，淋巴樣細胞反應3例，抗原檢測1例陽性。35例病人中5例陰性，其中有4例單核細胞比例小于10％。 結(jié)論本研究選用免疫細胞化學的方法對腦脊液單核細胞內(nèi)的結(jié)核桿菌抗原進行檢測及動態(tài)觀察腦脊液細胞學的變化，證實以上檢查對結(jié)腦的診斷、鑒別診斷及病情轉(zhuǎn)歸判斷均有很高的實用價值。實驗表明：免疫細胞化學方法和腦脊液細胞學對診斷結(jié)腦的敏感性較常規(guī)的抗酸桿