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文檔簡介
1、目的:觀察IL-4(interleukine-4)、IL-12在哮喘大鼠模型支氣管肺泡灌洗液(branchoalveolarlavagefluids,BALF)中的動態(tài)變化,探討其在哮喘發(fā)病機制中的作用及卡介菌多糖核酸(polysaccharidenucleicacidofBacillusCalmeetteguerin,BCG-PSN)干預治療的影響?! 》椒?將70只Wistar大鼠喂養(yǎng)7d后,隨機分為正常對照組(6只)、BCG-P
2、SN干預組(8只)和哮喘組(56只),哮喘組又隨機各取8只分為7個不同的時相組。哮喘各時相組、干預組于第1d及7d用蛋白粉(ovalbumin,OVA)10mg、氫氧化鋁20mg和生理鹽水配制成的2mL懸液腹腔注射致敏,對照組用生理鹽水2mL腹腔注射,干預組在致敏期間(1~7d)每天腹腔注射一次BCG-PSN(0.025g/kg);哮喘各時相組和干預組第15d開始均用1%OVA懸液霧化吸入激發(fā),1次/d,1h/次,共7d,對照組用生理鹽
3、水代替1%OVA懸液,余同哮喘組。末次激發(fā)后,對照組1h麻醉,干預組24h麻醉,哮喘各時相組分別于1h、8h、24h、48h、96h、7d和14d麻醉,各組麻醉后行支氣管肺泡灌洗(branchoalveolarlavage,BAL),用計數(shù)板計數(shù)BALF中炎癥細胞總數(shù)及嗜酸性細胞(eosinophile,EOS)數(shù),用流式細胞儀測定EOS凋亡率,用酶聯(lián)免疫吸附法(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)
4、測定IL-4、IL-12濃度,用圖像分析儀測定氣道內(nèi)周徑(insideapath,Pi),外周徑(outsideapath,Pe),并計算管壁面積(tubewallarea,WA),氣道平滑肌面積(smoothmuscleinbronchusarea,SMC-A),氣道平滑肌細胞數(shù)(smoothmuscleinbronchuscellnumber,N),且WA、SMC-A、N均用Pi進行標準化?! 〗Y(jié)果:哮喘各時相組BALF中炎癥細胞
5、總數(shù)和EOS數(shù)的動態(tài)變化均呈單峰,炎癥細胞總數(shù)1h上升,8h迅速上升,24-96h達到高峰,7d下降,14d降至對照組水平;EOS數(shù)1h上升,8h迅速上升,8~96h達到高峰,此后下降,但14d仍高于對照組;EOS凋亡率的動態(tài)變化呈雙峰,1h上升,而8h下降,24h降至低峰,48~96h快速上升,達到高峰,隨后下降,14d降至對照組水平;IL-4濃度的動態(tài)變化呈單峰,1h上升,8h迅速上升,24~96h達到高峰,此后下降,14d降至對照
6、組水平;IL-12濃度的動態(tài)變化呈雙峰,1h上升,8~24h迅速回落到低峰,48h再次上升,96h達到高峰,此后下降,14d降至對照組水平;哮喘各時相組IL-4濃度與EOS數(shù)呈正相關,IL-4/IL-12比值與EOS數(shù)呈高度正相關,而IL-12與EOS數(shù)無相關性;IL-4濃度與EOS凋亡率無相關性,IL-12與EOS凋亡率呈正相關,但IL-12/IL-4比值與EOS凋亡率無相關性;隨時間推移,哮喘各時相組WA/Pi、SMC-A/Pi、N
7、/Pi均較對照組依次升高;干預組IL-4、IL-12、炎癥細胞總數(shù)、EOS數(shù)、EOS凋亡率、WA/Pi、SMC-A/Pi和N/Pi均較對照組升高;與哮喘24h組比較,除IL-12升高外,其余指標均降低;BCG-PSN干預后,IL-4濃度與EOS數(shù)、IL-4/IL-12比值與EOS數(shù)、IL-12與EOS凋亡率均呈正相關;而IL-4濃度與EOS凋亡率、IL-12與EOS數(shù)、IL-12/IL-4與EOS凋亡率均無相關性?! 〗Y(jié)論:IL-4/
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