芪丹通脈片對(duì)急性心肌缺血大鼠降鈣素基因相關(guān)肽的影響.pdf

1、本研究的目的是復(fù)制冠狀動(dòng)脈痙攣引起的心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ?，觀察芪丹通脈片(Qidantongmaitablet，QDTMT)對(duì)CGRP釋放與合成的影響，檢測(cè)大鼠血漿中CGRP，ET含量在各實(shí)驗(yàn)組中的變化；進(jìn)一步觀察心肌中CGRP免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維數(shù)量在各實(shí)驗(yàn)組中的差別。對(duì)中醫(yī)復(fù)方進(jìn)行現(xiàn)代研究，旨在從促進(jìn)內(nèi)源性保護(hù)物質(zhì)合成與釋放方面，探討QDTMT對(duì)缺血心肌的保護(hù)作用，為揭示中藥在體內(nèi)發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容如下：

2、 1.大鼠腹腔注射垂體后葉素(pituitrin，Pit)致急性心肌缺血作為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，觀察心電圖變化。 60只SD雄性大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只?？瞻讓?duì)照組，模型組，單硝酸異山梨酯片組，芪丹通脈片低、中、高劑量組。灌胃15天后，用RM-6280多導(dǎo)生理記錄儀，先連續(xù)觀察并記錄一段Ⅱ?qū)У恼Ｐ碾妶D，然后模型組及給藥組分別腹腔注射Pit20U/kg，空白對(duì)照組腹腔注射等劑量生理鹽水，造模后繼續(xù)監(jiān)測(cè)心電圖變化。取2、5、

3、7、10、15min5個(gè)時(shí)點(diǎn)，以J點(diǎn)(指QRS終點(diǎn)和ST段開始交接之點(diǎn))為測(cè)定點(diǎn)，記錄并計(jì)算J點(diǎn)的變化值(無論升高或降低，取其變化的絕對(duì)值)。結(jié)果：各藥物組與模型組比較，在5個(gè)時(shí)段J點(diǎn)變化均減少，QDTMT高劑量組與IMT組比較，J點(diǎn)變化無顯著差異。 2.各組大鼠血漿中CGRP，ET含量變化。 造模20min后，將各實(shí)驗(yàn)組大鼠腹主靜脈取血4mL，抗凝，混勻，離心，保存待測(cè)。采用放射性免疫法對(duì)各組標(biāo)本進(jìn)行CGRP，ET含量

4、的測(cè)定。結(jié)果：模型組與空白對(duì)照組比較，血漿CGRP，ET含量均升高；QDTMT各劑量組較模型組血漿CGRP含量均升高，血漿ET含量均降低；IMT組與QDTMT低、中劑量組比較兩項(xiàng)指標(biāo)都有顯著差異，與QDTMT高劑量組比較差別不顯著。 3.心肌左室前壁CGRP免疫反應(yīng)陽性纖維數(shù)量及形態(tài)變化。 制備各實(shí)驗(yàn)組心肌左室前壁組織標(biāo)本，采用免疫組化方法檢測(cè)CGRP免疫反應(yīng)陽性纖維數(shù)量及形態(tài)變化。結(jié)果：CGRP免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維在左

5、心室前壁有廣泛分布，模型組CGRP免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維數(shù)量明顯少于空白對(duì)照組，纖維明顯變短變細(xì)。QDTMT低、中、高劑量組CGRP免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維數(shù)量明顯高于模型組，且呈劑量依賴性。IMT組與QDTMT中、高劑量組的CGRP免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維數(shù)量區(qū)別不大，但高于模型組，對(duì)照實(shí)驗(yàn)的切片均未見CGRP免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維。 本研究運(yùn)用腹腔注射Pit20U/kg，引起冠狀動(dòng)脈痙攣復(fù)制急性心肌缺血模型。心電圖J點(diǎn)先下降，即則抬高，

6、甚至表現(xiàn)為單向曲線，表明腹腔注射垂體后葉素致心肌缺血模型復(fù)制成功。采用放射免疫法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組大鼠血漿CGRP、ET含量的變化，結(jié)果提示，QDTMT可能促進(jìn)大鼠CGRP的釋放，抑制ET的釋放，發(fā)揮對(duì)缺血性心臟病的防治作用。本文進(jìn)一步采用免疫組化法檢測(cè)心肌CGRP免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維數(shù)量及形態(tài)的變化，結(jié)果提示QDTMT對(duì)缺血心肌的保護(hù)作用可能是通過促進(jìn)CGRP合成來實(shí)現(xiàn)的，且該種作用隨著QDTMT劑量增高而增強(qiáng)。本研究為闡明QDTMT對(duì)缺血