牙髓干細(xì)胞應(yīng)用于肌腱-韌帶組織再生的體內(nèi)外研究.pdf

1、肌腱/韌帶是連接肌肉/骨骼和骨骼的規(guī)則致密結(jié)締組織，并起到傳遞張力負(fù)載的作用。肌腱/韌帶組織自身修復(fù)能力有限，受損后無(wú)法恢復(fù)原有的機(jī)械力學(xué)性能，且伴隨有大量疤痕組織增生，引起嚴(yán)重的功能紊亂和殘疾，導(dǎo)致關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)異常和疼痛。傳統(tǒng)的治療理療方法只能緩解疼痛，而手術(shù)治療如手術(shù)縫合、自體或異體移植方法雖有一定效果，但是療效有限，即使是自體肌腱移植修復(fù)液只能達(dá)到正常肌腱力學(xué)性能的40％左右，且伴隨著大量瘢痕組織增生。同時(shí)，這些治療方法都存在不可避免

2、的并發(fā)癥，例如供體區(qū)的受損、疾病的傳播、移植物的免疫排斥反應(yīng)、反復(fù)發(fā)生的肌腱撕裂等問(wèn)題。在過(guò)去的20年隨著生物材料學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，肌腱組織工程研究取得很大的進(jìn)步，為缺損肌腱的修復(fù)提供一條嶄新的可行性途徑。
　　近年來(lái)，通過(guò)利用干細(xì)胞復(fù)合支架材料構(gòu)建人工組織以促進(jìn)受損組織再生，為肌腱組織的再生帶來(lái)了全新的希望。肌腱組織工程技術(shù)臨床轉(zhuǎn)化前需迫切解決的三個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題：1）獲得足夠量且具有腱系分化能力的種子細(xì)胞；2）具有誘導(dǎo)腱系分化

3、性能的生物材料；3）有利于種子細(xì)胞分化的力學(xué)刺激或適合的生態(tài)環(huán)境，如加生長(zhǎng)因子。然而，目前這些問(wèn)題尚未完全解決，影響了肌腱組織工程的發(fā)展，從而制約了組織工程肌腱在臨床用于肌腱缺損再生修復(fù)治療。所以，本論文針對(duì)這三個(gè)問(wèn)題，立足于本研究室前期的干細(xì)胞與生物材料相關(guān)研究成果，進(jìn)行了成系列的研究，最終目的為運(yùn)用牙髓干細(xì)胞與生物支架構(gòu)建組織工程肌腱，為實(shí)現(xiàn)肌腱的再生打下良好的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　本論文研究?jī)?nèi)容包含：第一部分分離培養(yǎng)了人成體牙髓干

4、細(xì)胞，并證實(shí)其均具有克隆形成能力和多向分化潛能等干細(xì)胞特性；第二部分比較牙髓組織和肌腱組織中肌腱/韌帶相關(guān)的蛋白表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)牙髓組織中高表達(dá)肌腱/韌帶相關(guān)的蛋白，特別是在成牙本質(zhì)細(xì)胞層；同時(shí)發(fā)現(xiàn)分離培養(yǎng)的牙髓干細(xì)胞也有部分肌腱相關(guān)膠原蛋白的強(qiáng)表達(dá)；第三部分研究PGA復(fù)合支架誘導(dǎo)牙髓干細(xì)胞的相互作用，發(fā)現(xiàn)平行排列聚乙醇酸材料與牙髓干細(xì)胞有較好的生物相容性，會(huì)激發(fā)牙髓干細(xì)胞向腱系分化，且肌腱/韌帶相關(guān)的基因表達(dá)不斷增高；并適合作為肌腱組織