甘肅紅芪和黃芪體內(nèi)外主要活性成分對比研究.pdf

1、《中華人民共和國藥典》2015版（一部）顯示，紅芪和黃芪功效完全相同。在傳統(tǒng)中醫(yī)用藥中黃芪和紅芪不分，兩者自古就通用。在歷代本草文獻(xiàn)中，黃芪項(xiàng)下的“赤水耆”、“赤色者”即為西北地區(qū)應(yīng)用歷史悠久的紅芪。《中華人民共和國藥典》1977、1995年版將紅芪列為正品黃芪之一，1985、2005、2010、2015年版將二者分開，將紅芪單列為一種中藥，不與黃芪混用。為了探討《中華人民共和國藥典》將紅芪和黃芪這兩種功效相同藥材由原來在一個品種項(xiàng)下，

2、但最終列為兩個品種的科學(xué)道理，本研究以兩藥材道地產(chǎn)區(qū)甘肅不同區(qū)縣所產(chǎn)紅芪和黃芪為研究對象，分別采集禮縣、岷縣、渭源、隴西、宕昌、武都地區(qū)的1年和2年生紅芪各28批，以及與紅芪在同一產(chǎn)地的1年和2年生黃芪各28批（即采集紅芪樣品時，采集當(dāng)?shù)氐狞S芪），對比研究二者主要活性成分皂苷、黃酮、多糖類含量差異以及兩藥材皂苷和黃酮類成分指紋圖譜的區(qū)別（相似度），并分析每一種藥材主要活性成分及指紋圖譜隨年限變化的規(guī)律，同時對比紅芪和黃芪血中移行成分的異

3、同。采用T檢驗(yàn)、聚類分析及主成分分析對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理并對比分析，綜合兩藥材體內(nèi)外活性成分對比分析結(jié)果，探索具有同一功效的紅芪和黃芪在體內(nèi)外主要活性成分的差異，以及二者各自的優(yōu)勢。本研究主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1紅芪和黃芪黃酮、皂苷、多糖含量研究
　　1.1黃芪甲苷含量對比
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:紅芪中含有黃芪甲苷，其黃芪甲苷的含量為0.0555μg/g;黃芪中黃芪甲苷的含量為37.9μg/g，黃芪中黃芪甲菅的含量為紅芪的68

4、2倍。紅芪中黃芪甲苷含量甚微，進(jìn)行含量測定沒有意義。
　　1.2總黃酮、總皂菅、總多糖含量測定
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:甘肅1-2年生紅芪總黃酮、總皂苷含量均低于黃芪，2年生二者總黃酮含量無顯著性差異，總皂苷含量有極顯著性差異。1-2年生紅芪中總黃酮、總皂苷含量均為武都＞宕昌，1-2年生黃芪總黃酮、總皂苷含量均為宕昌＞武都。兩藥材總皂苷、總黃酮含量均為1年生低于2年生，2年生藥材質(zhì)量更好。通常紅芪、黃芪均采集2年生藥材，所以從發(fā)揮皂苷

5、作用分析，黃芪比紅芪更具有優(yōu)勢。
　　甘肅1年生紅芪總多糖含量高于黃芪，而2年生紅芪總多糖含量低于黃芪。1年和2年生紅芪均以宕昌產(chǎn)較優(yōu);1年生黃芪以隴西、岷縣較優(yōu)，2年生以武都較優(yōu)。紅芪總多糖含量為1年生高于2年生。黃芪總多糖含量為1年生低于2年生。從總多糖含量分析，1年生紅芪藥材含量最高，相對于2年生紅芪和1年、2年黃芪來說，紅芪更具有優(yōu)勢，在選擇發(fā)揮多糖藥效時，應(yīng)采用1年生紅芪藥材。
　　1.34種異黃酮類成分含量測定<

6、br>　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:甘肅1-2年生紅芪芒柄花素的含量均高于黃芪，毛蕊異黃酮苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮及4種異黃酮含量總和均低于黃芪。1-2年生紅芪以武都最優(yōu)，黃芪以宕昌最優(yōu)。紅芪和黃芪4種異黃酮類成分含量總和均為1年略高于2年。從4種主要異黃酮類成分含量分析，紅芪中芒柄花素含量是黃芪的3.9-6.2倍（1-2年數(shù)據(jù)），所以要側(cè)重發(fā)揮芒柄花素的藥理活性，采用紅芪更具有優(yōu)勢;黃芪在毛蕊異黃酮苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮含量及4種異黃酮含量總和上比

7、紅芪高，特別是黃芪中毛蕊異黃酮苷含量是紅芪的35.8-64.8倍（1-2年數(shù)據(jù)），所以要側(cè)重發(fā)揮毛蕊異黃酮苷的藥理活性，采用黃芪更具有優(yōu)勢。
　　1.4統(tǒng)計分析
　　運(yùn)用R3.3.2軟件，采用聚類分析、主成分分析方法，對甘肅紅芪和黃芪的總黃酮、總皂苷、總多糖、毛蕊異黃酮苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮、芒柄花素含量及4種異黃酮含量總和進(jìn)行綜合分析，結(jié)果表明二者均存在顯著性差異。聚類分析表明，紅芪和黃芪聚成兩大類，完全分開。說明紅芪、

8、黃芪兩種藥材品質(zhì)不同。主成分分析表明，黃芪比紅芪更具有優(yōu)勢，總體上紅芪、黃芪均體現(xiàn)為2年生優(yōu)于1年生樣品，并且體現(xiàn)出在甘肅5縣1市區(qū)武都產(chǎn)紅芪質(zhì)量優(yōu)良，宕昌縣黃芪質(zhì)量優(yōu)良。綜合含量統(tǒng)計分析結(jié)果，紅芪與黃芪完全分開，黃芪在主要有效成分含量上相對于紅芪來說，總體上具有優(yōu)勢。
　　2紅芪和黃芪指紋圖譜研究
　　2.1以觀察黃酮類成分為主的指紋圖譜
　　甘肅紅芪1年生、2年生藥材黃酮類成分指紋圖譜均有19個共有峰，甘肅黃芪1年

9、生、2年生黃酮類成分指紋圖譜均有14個共有峰。1年生紅芪和黃芪黃酮類成分色譜峰共同匹配，其指紋圖譜共有峰為9個;2年生紅芪和黃芪黃酮類成分色譜峰共同匹配后，指紋圖譜共有峰為8個;其中，已知共有峰均為毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷、芒柄花素。說明甘肅紅芪和黃芪藥材從1年到2年，隨著生長年限的增加，二者共有黃酮類成分?jǐn)?shù)目減少，但4個主要黃酮類成分不變，二者既有相同點(diǎn)又有不同點(diǎn)。
　　1年生紅芪和黃芪與對照圖譜平均相似度分別為68％

10、、92.4％;2年生紅芪和黃芪與對照圖譜平均相似度分別為77.4％、79.1％。1年生紅芪與黃芪相似度為53.4％，2年生紅芪與黃芪相似度為49％。說明甘肅不同產(chǎn)地黃芪藥材差異較小，相對而言，紅芪差異較大。從1年到2年，隨著生長年限增加，紅芪相似度增加，黃芪的相似度降低。二者黃酮類指紋圖譜相似度說明，紅芪和黃芪在該色譜條件下有一定相同的物質(zhì)基礎(chǔ)，這可能是功效相同的一個體現(xiàn)，但同時也說明二者應(yīng)該為兩個品種，因?yàn)橄嗨贫葍H在50％左右。

11、>　　2.2以觀察皂苷類成分為主的指紋圖譜
　　甘肅紅芪1年生、2年生藥材皂苷類成分指紋圖譜共有峰分別為8個和7個，甘肅黃芪1年生、2年生皂苷類成分指紋圖譜共有峰分別為25個和17個。1年生紅芪和黃芪皂苷類成分色譜峰共同匹配后，其指紋圖譜共有峰為4個;2年生紅芪和黃芪皂苷類成分色譜峰共同匹配后，指紋圖譜共有峰為4個;1年生兩藥材共有的4個色譜峰和2年生兩藥材共有的4個色譜峰相同且為已知成分，分別為毛蕊異黃酮苷、芒柄花苷、異黃芪皂苷

12、Ⅱ、黃芪皂苷Ⅰ。說明甘肅紅芪和黃芪藥材從1年到2年，隨著生長年限的增加，二者共有的成分種類和數(shù)目不變，二者既有相同點(diǎn)又有不同點(diǎn)。
　　1年生紅芪和黃芪與對照圖譜平均相似度分別為15.7％、70％;2年生紅芪和黃芪與對照圖譜平均相似度分別為15.4％、60％。1年生紅芪與黃芪相似度為3.2％，2年生紅芪與黃芪相似度為2.3％。說明甘肅不同產(chǎn)地黃芪藥材相對于紅芪而言差異較小。并且從1年到2年，隨著生長年限增加，紅芪和黃芪相似度降低。二

13、者皂苷類指紋圖譜相似度說明，紅芪和黃芪在該色譜條件下，相同的物質(zhì)基礎(chǔ)很少，進(jìn)一步說明二者應(yīng)該為兩個品種，因?yàn)橄嗨贫仍?％左右。
　　3、紅芪和黃芪血中移行成分研究
　　紅芪在血中移行成分最多時有8個成分，黃芪在血中移行成分最多時有13個成分，二者差別較大。紅芪和黃芪血中相同的移行成分為4種異黃酮，還有其它5種成分在有的時間點(diǎn)共有。從血中的移行成分分析，二者有一定的共有成分，但大多數(shù)成分不同。血中移行成分相同可能是二者功效相同

14、的一方面原因，血中不同移行成分可能導(dǎo)致二者功效差異。給藥劑量相同的條件下，黃芪可能有一定的優(yōu)勢。這一結(jié)論為《中華人民共和國藥典》將紅芪和黃芪分別列為兩個品種提供了一定的科學(xué)依據(jù)。
　　4、結(jié)論
　　本文從紅芪和黃芪藥效物質(zhì)基礎(chǔ)入手，對比了兩種藥材在黃芪甲苷、3大類成分、4種主要異黃酮活性成分、2個色譜條件的指紋圖譜、血中移行成分的異同，并采用聚類分析和主成分分析綜合藥材各成分含量指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)二者均存在顯著性差異。研究表明:紅芪

15、中黃芪甲苷的含量僅為黃芪的1/682，在黃芪甲苷所發(fā)揮的藥效方面二者將產(chǎn)生不同效果。聚類分析顯示，紅芪、黃芪完全聚成兩類，說明它們品質(zhì)不同。統(tǒng)計學(xué)綜合評價顯示兩種藥材的3大類成分含量、4種異黃酮成分含量有顯著性差異，黃芪相對于紅芪來說，總體上質(zhì)量有一定優(yōu)勢，但紅芪在某些藥效物質(zhì)基礎(chǔ)方面（芒柄花素、總多糖）更具優(yōu)勢。2年生紅芪、黃芪藥材質(zhì)量均優(yōu)于1年生藥材。在甘肅5縣1市內(nèi)武都產(chǎn)紅芪質(zhì)量優(yōu)良，宕昌產(chǎn)黃芪質(zhì)量優(yōu)良。紅芪、黃芪可能具有一定類似