馬錢子主要活性成分UGT酶代謝作用.pdf

1、馬錢子具有多種藥理活性，毒性很強(qiáng)，是衛(wèi)生部規(guī)定的毒性藥品管理品種之一。馬錢子堿和士的寧既是馬錢子的有效成分又是其毒性成分，目前關(guān)于這兩種成分的代謝研究很多，但葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGTs)參與的Ⅱ相代謝相關(guān)內(nèi)容還未見報道。Ⅱ相代謝是機(jī)體重要的解毒途徑，對馬錢子堿和士的寧Ⅱ相代謝的研究，在臨床上對減少馬錢子不良反應(yīng)的發(fā)生具有重要的意義。
　　目的:
　　本論文以馬錢子堿和士的寧為研究對象，針對其葡糖醛酸結(jié)合產(chǎn)物進(jìn)行體外代謝研究，

2、考察其在人肝微粒體(HLM)和UGT重組酶孵育體系中葡萄糖醛酸化代謝情況。
　　方法:
　　建立以HLM為載體的Ⅱ相代謝反應(yīng)體系，采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)法測定馬錢子堿和士的寧在不同種屬（人、鼠）、臟器（肝、腸）微粒體中代謝產(chǎn)物含量。采用化學(xué)抑制劑和人源化重組UGTs酶，考察馬錢子堿和士的寧的酶代動力學(xué)參數(shù)，研究參與其體外Ⅱ相代謝的UGTs亞酶。
　　結(jié)果:
　　馬錢子堿和士的寧均在H

3、LM里產(chǎn)生1個單葡萄糖醛酸代謝產(chǎn)物，初步確定其結(jié)合位點(diǎn)在N原子上，其他種屬、臟器中均未測得二者的代謝產(chǎn)物。采用Eadie-Hofstee作圖發(fā)現(xiàn)馬錢子堿和士的寧葡萄糖醛酸化反應(yīng)均呈現(xiàn)單相特征，單酶試驗(yàn)中二者只在UGT1A4重組酶中發(fā)生代謝。進(jìn)一步研究顯示二者在人重組UGT1A4孵育體系中所得的酶動力學(xué)參數(shù)與HLMs中所得的酶動力學(xué)參數(shù)相似，加入UGT1A4特異性抑制劑海柯皂苷元后代謝產(chǎn)物含量均有所降低。
　　結(jié)論:
　　馬錢