BMP-2，4在腸神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)與分布.pdf

1、腸神經(jīng)系統(tǒng)(enteric nervous system，ENS)是最大的外周神經(jīng)系統(tǒng)，它的異常可引起很多先天性疾病，如先天性巨結(jié)腸及巨結(jié)腸類緣病，目前研究表明先天性肛門直腸畸形患兒的腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育也存在異常，并影響到術(shù)后排便功能的恢復(fù)。但具體有哪些因素可影響腸神經(jīng)系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育，以及神經(jīng)嵴細(xì)胞如何轉(zhuǎn)化形成神經(jīng)節(jié)細(xì)胞尚不清楚。據(jù)報(bào)道，很多因子參與了腸神經(jīng)系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程，如核轉(zhuǎn)錄因子HOX、NKX因子等。近來(lái)的研究表明，骨形成蛋白BM

2、P-2和BMP-4在中胚層誘導(dǎo)、胚胎時(shí)期器官發(fā)育和中樞神經(jīng)發(fā)育過(guò)程中起重要作用，但是否在腸神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá)及發(fā)揮作用則鮮有報(bào)道。本研究通過(guò)觀察骨形成蛋白BMP-2、BMP-4在SD大鼠胚胎腸管、肛門直腸畸形胎鼠直腸末端及先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung's disease，HD)患兒神經(jīng)節(jié)正常腸段和神經(jīng)節(jié)缺如腸段中的定位及表達(dá)規(guī)律，探討它們?cè)谀c神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中可能的作用，為下一步研究提供方向。 　　方法:本實(shí)驗(yàn)使用免疫組化SP法

3、對(duì)不同年齡的sD大鼠結(jié)腸腸管、乙酰硫脲(ethyleriethioLlrea，ETU)致畸的胎鼠直腸和先天性巨結(jié)腸患兒及對(duì)照者的手術(shù)標(biāo)本行HE常規(guī)染色和免疫組化染色，觀察BMP-2，4在腸神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)情況。應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)對(duì)所采集圖像進(jìn)行分析。 結(jié)果: 1.BMP-2和BMP-4在不同年齡的SD大鼠結(jié)腸腸管中的表達(dá)BMP-2和BMP-4在腸壁全層均有表達(dá)，在胚胎發(fā)育早期(E12.5)的腸管中，未見到神經(jīng)嵴細(xì)胞，發(fā)

4、育中期(E16)黏膜下和肌間神經(jīng)叢的神經(jīng)嵴細(xì)胞出現(xiàn)BMP-2染色陽(yáng)性，肌間神經(jīng)叢神經(jīng)嵴細(xì)胞可見BMP-4陽(yáng)性表達(dá)，黏膜下神經(jīng)叢的神經(jīng)嵴細(xì)胞未見到BMP-4染色陽(yáng)性；發(fā)育晚期(E20)黏膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢神經(jīng)節(jié)細(xì)胞BMP-2染色強(qiáng)陽(yáng)性，肌間神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞BMP-4染色呈強(qiáng)陽(yáng)性，而黏膜下神經(jīng)叢BMP-4染色相對(duì)較弱；出生后(7d)時(shí)BMP-2和BMP-4染色強(qiáng)陽(yáng)性的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞在黏膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢均有表達(dá)；成年大鼠(4月)時(shí)BM

5、P-2和BMP-4在肌間神經(jīng)叢中的神經(jīng)嵴細(xì)胞呈弱陽(yáng)性表達(dá)，黏膜下神經(jīng)叢中神經(jīng)嵴細(xì)胞表達(dá)更弱。 2.BMP-2和BMP-4在無(wú)肛胎鼠模型直腸中的表達(dá)光鏡下可見無(wú)肛胎鼠直腸末端未與外界相通，形成盲端，末端膨大，黏膜形成皺褶。BMP-2和BMP-4在腸壁全層均有表達(dá)，包括大鼠黏膜、間充質(zhì)和肌間神經(jīng)叢，在直腸盲端處的神經(jīng)叢表達(dá)明顯減少。致畸組與正常對(duì)照組、有肛組相比有明顯差異(P<0.05)，正常對(duì)照組與有肛組無(wú)明顯差異(P>0.05)

6、。 3.BMP-2和BMP-4在先天性巨結(jié)腸中的表達(dá) BMP-2，4在各段腸管縱肌層、環(huán)肌層和黏膜肌層平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)，在HD擴(kuò)張段神經(jīng)叢內(nèi)的表達(dá)與正常對(duì)照組無(wú)明顯差別(P>0.05)，在移行段、狹窄段神經(jīng)叢內(nèi)的分布與正常對(duì)照組、擴(kuò)張段相比呈不同程度的減少，差異有顯著性意義(P<0.05)。BMP-2與BMP-4的表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論腸神經(jīng)系統(tǒng)中存在BMP-2，4的表達(dá)，它們表達(dá)具有時(shí)相