胰島素的海藻酸鹽-殼聚糖微球載體制備和口服給藥研究.pdf

1、目前，注射幾乎是胰島素臨床應(yīng)用的惟一給藥途徑，存在突出問題是，藥物在血液中半衰期短，必須重復(fù)注射給藥。對于必須長期甚至終身依賴胰島素治療患者，這種特性將造成患者在身體、精神、經(jīng)濟(jì)上的巨大負(fù)擔(dān)。因此，發(fā)展胰島素非注射給藥途徑是國內(nèi)外醫(yī)藥界關(guān)注的重大課題?？赡艿姆亲⑸浣o藥途徑中，口服是理想的給藥方式，具有服用方便安全、患者治療依從性高等優(yōu)勢。但是，胰島素直接口服易被胃腸道消化酶降解并喪失療效。同時，作為兩性分子，其親水特性使之不能跨越小腸上

2、皮吸收屏障。 針對胰島素口服給藥面臨的主要問題，本文采用脈沖電場微球制備工藝，以海藻酸鹽、殼聚糖為載體材料，開展了載胰島素口服微球的制備工藝研究。采用真空冷凍干燥技術(shù)對載藥微球干燥處理后，進(jìn)行了微球口服給藥的藥效學(xué)、藥動學(xué)、以及藥理相對生物利用度的研究。主要研究結(jié)果如下： 1．采用脈沖電場工藝制備了載胰島素殼聚糖一海藻酸鈣微球。以微球粒徑和球形度為指標(biāo)，采用正交實驗設(shè)計法優(yōu)化工藝條件；利用倒置生物顯微鏡和掃描電鏡測定微球

3、粒徑、觀察微球的表面形態(tài)以及內(nèi)部結(jié)構(gòu)。采用考馬斯亮藍(lán)法測定微球中胰島素藥物的包封率。結(jié)果表明，銳孔孔徑是影響微球粒徑的最顯著的因素。優(yōu)化工藝條件為450μm銳孔直徑、2cm液面距、10mg/mL海藻酸鈉濃度、8mL/h推進(jìn)速度、金屬皿作凝膠浴容器。 2．采用真空冷凍干燥法制備了載胰島素微球的凍干劑，考察了微球冷凍干燥前后粒徑變化以及微球中胰島素相對活性的變化。結(jié)果表明，凍干對微球中藥物的活性影響較小，但能夠大大減小微球的粒徑，凍

4、干后，微球平均粒徑由123岬減小為48岬，粒徑減小率為61％。 3．建立糖尿病動物模型，為進(jìn)行微球口服的藥效學(xué)和藥動學(xué)研究提供穩(wěn)定可靠的動物模型。采用體重為18～22g的昆明種小白鼠腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶生理鹽水溶液，建立了類似人類I型糖尿病的動物模型。 4．胰島素微球口服給藥的藥效學(xué)實驗表明：微球不僅對正常小鼠有降血糖作用，而且對四氧嘧啶致糖尿病小鼠也有降血糖作用，且血糖降低水平與劑量之間存在一定量效的關(guān)系。

5、正常小鼠口服平均粒徑48岬載胰島素微球，6h時血糖降低率最大，10h內(nèi)具有降血糖作用。給予正常小鼠不同劑量的胰島素微球，口服3.2 IU/kg劑量6h時使小鼠血糖下降27.2％，6IU/kg劑量使小鼠血糖降低40％。對于糖尿病小鼠而言，降血糖作用更為明顯。口服粒徑為48μm、劑量為4.8IU/kg載胰島素微球，在6h～10h內(nèi)維持血糖值處于較低水平， 6h達(dá)到最低值，10h血糖值恢復(fù)為原有的46.01％，整個降血糖過程緩慢而有效。與皮下

6、注射給藥方式相比，口服胰島素的藥理相對生物利用度為41.20％。糖尿病小鼠口服高(4.8IU/kg)、中(3.6IU/kg)、低(2.4IU/kg)三個劑量的載胰島素微球，高劑量的降血糖作用明顯優(yōu)于中低劑量，最大降血糖百分率分別為57.31％、40.16％、23.87％。 5．藥動學(xué)實驗表明：采用糖尿病小鼠模型作為研究對象，口服4.8IU/kg載胰島素微球，血清胰島素呈現(xiàn)出緩慢而平穩(wěn)的上升過程，血清胰島素含量在4h為最高值。與皮下注射給