阿魏酸載脂質(zhì)體殼聚糖微球口服給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、背景:
　　 口服給藥是臨床最主要的給藥途徑之一。對(duì)半衰期短的難溶性藥物而言,如何增強(qiáng)藥物吸收,延長(zhǎng)藥效持續(xù)時(shí)間,以減少服藥劑量和給藥次數(shù),對(duì)臨床用藥具有重要意義,一直是藥劑學(xué)研究的熱點(diǎn)。為此,以高分子載體為主的各種口服給藥系統(tǒng)被不斷研發(fā)。它們或具有良好的緩釋性能,或能改善藥物吸收,但兼而有之的給藥系統(tǒng)卻很少。
　　 脂質(zhì)體和殼聚糖微球是常用的兩類藥物載體。兩類載體各有特點(diǎn):脂質(zhì)體生物相容性好、可促進(jìn)藥物吸收,但穩(wěn)定性差

2、,尤其不宜口服給藥；殼聚糖微球穩(wěn)定性好,具有獨(dú)特的聚合陽(yáng)離子特性、親水凝膠性和生物黏附性,可延緩藥物釋放、增進(jìn)吸收。若能將兩類載體適當(dāng)結(jié)合,取長(zhǎng)補(bǔ)短,或能開(kāi)發(fā)出一種新的口服給藥系統(tǒng),既能延緩藥物釋放又能促進(jìn)藥物吸收。
　　 目的:
　　 本研究以阿魏酸(Ferulic acid,FA)為模型藥物,先制備脂質(zhì)體(liposome,LP),再將其包入殼聚糖微球(chitosan microsphere,CM)中,制備出骨架型

3、的載脂質(zhì)體殼聚糖微球(liposomes-in-chitosan microsphere,LICM)。重點(diǎn)對(duì)LICM的制備工藝、結(jié)構(gòu)、體外釋藥機(jī)理、體內(nèi)吸收等內(nèi)容進(jìn)行研究,旨在為L(zhǎng)ICM的制備和評(píng)價(jià)提供參考,以期最終研發(fā)出一種融合了脂質(zhì)體和殼聚糖優(yōu)勢(shì)的新型口服給藥系統(tǒng)。
　　 方法與結(jié)果:
　　 1.FA-CM的制備與表征
　　 首先以包封率和載藥量為指標(biāo),采用單因素實(shí)驗(yàn)法分別研究了離子凝聚法和乳化交聯(lián)法制備FA

4、-CM的工藝,以為L(zhǎng)ICM的制備提供參考。在以三聚磷酸鈉為凝聚劑的離子凝聚法中,凝聚液的pH值和用量、投藥量是影響包封率和載藥量的重要因素:降低凝聚液的pH值,減少用量或增大投藥量均能顯著提高包封率和載藥量。優(yōu)化工藝下3批FA-CM的平均包封率為73.77±1.89％,平均載藥量為8.08±0.27％,平均粒徑為1.13±0.11㎜。
　　 乳化交聯(lián)法的制備工藝中,油相組成、乳化劑組成、油水相體積比、戊二醛用量、殼聚糖濃度和投藥

5、量均對(duì)包封率、載藥量有一定影響。以二甲硅油為油相,濃度為2.5％的殼聚糖為水相,吐溫80:司盤80(1:1)為乳化劑,適當(dāng)降低油水相體積比,增大戊二醛用量和投藥量,有利于提高包封率和載藥量。優(yōu)化工藝下3批FA-CM的平均包封率為76.33±2.07％,平均載藥量為5.75±0.14％,平均粒徑為88.978±12.41 um。
　　 2.FA-LP的制備與吸收
　　 隨后研究了FA-LP的制備工藝和腸吸收。醋酸鈣梯度法制

6、備FA-LP。以包封率為指標(biāo),采用單因素實(shí)驗(yàn)法確定了主動(dòng)載藥的孵育條件,采用Doehlert設(shè)計(jì)對(duì)投藥量、磷脂與藥物的摩爾比和膽固醇與磷脂的摩爾比3個(gè)因素進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化工藝下制備的3批FA-LP平均包封率為79.97±O.54％,平均粒徑為187.6±11.9nm,zeta電位為-12.67±1.78。大鼠在體腸吸收實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,脂質(zhì)體能促進(jìn)阿魏酸的吸收:在十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸和整腸段,脂質(zhì)體的ka分別為原料藥的1.78、1.7

7、3、1.97、1.57和1.87倍,3 h的吸收百分率分別提高了63.58％、54.52％、65.62％、64.76％和31.22％。
　　 3.FA-LICM的制備、表征及體外釋放
　　 制備工藝再采用離子凝聚法和乳化交聯(lián)法將FA-LP載入CM中,制備出LICM。分別研究了殼聚糖終濃度、殼聚糖溶液與脂質(zhì)體的體積比、凝聚液的濃度和pH值或殼聚糖終濃度、殼聚糖溶液與脂質(zhì)體的體積比、乳化劑濃度和固化劑用量4個(gè)因素對(duì)微球載藥量

8、的影響。離子凝聚法制備的載脂質(zhì)體殼聚糖微球(liposomes-in-chitosan microsphere prepared by onic gelation method,IACMi),載藥量在O.317-O.694％之間,疑聚液pH值和殼聚糖溶液與脂質(zhì)體的體積比對(duì)載藥量有較大影響:提高凝聚液pH值或增加脂質(zhì)體的用量均可提高載藥量。乳化交聯(lián)法制備的載脂質(zhì)體殼聚糖微球(liposomes-in-chitosan microspher

9、e prepared byemulsion cross-link method,LICMe),載藥量在O.426-0.974％之間,各因素對(duì)載藥量均有較大影響:適當(dāng)降低殼聚糖或乳化劑的濃度,提高脂質(zhì)體或固化劑用量有利于提高載藥量。
　　 體外釋放 LICM的體外釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,無(wú)論是離子凝聚法還是乳化交聯(lián)法,脂質(zhì)體自LICM中的釋放速率與藥物自CM中的釋放速率相近:Cmi中,藥物2h釋放了39.71％,8h釋放了79.18％,

10、12h釋放了89.31％,符合weibull分布；各工藝的LICMi中,脂質(zhì)體2h釋放了15-30％左右,8h釋放了55-80％,12h釋放了65-90％,均符合weibull分布。Cme的突釋效應(yīng)強(qiáng),藥物2h釋放了74.7％,4h釋放了88.43％,8h即已釋放了92.77％,符合weibull分布；各工藝的LICMe具有類似的強(qiáng)突釋效應(yīng),脂質(zhì)體2h釋放了70％左右,4h釋放了80％左右,8h釋放率接近90％,也均符合weibull分

11、布?？梢?jiàn),脂質(zhì)體取代原料藥包入CM中,并沒(méi)有改變CM本身的釋放性能。兩種方法制備的LIACM,脂質(zhì)體釋放后粒徑均有所增大:分別由原始的115.3 nm增至330±41 nm(LICMi)和209±18nm(LICMe)。
　　 藥物自LICM中的釋放速率明顯慢于CM。各工藝的LICMi中,2h釋藥5-6％,12h釋藥30-40％,24h釋藥55-75％,大多符合weibull分布和零級(jí)動(dòng)力學(xué)方程。各處方的IACMe,2h藥物釋放

12、了20-30％,12h釋放了50-60％左右,24h釋放率接近65-70％,均符合weibull分布。LICMi的釋藥速率慢于LICMe,這與LICMi脂質(zhì)體釋放較慢且釋放后粒徑增大更多的結(jié)果一致。由此說(shuō)明,LICM的藥物釋放分兩步進(jìn)行:脂質(zhì)體先從LICM中釋放,藥物再?gòu)闹|(zhì)體中釋放。
　　 表征分別用掃描電鏡、DSC和X射線衍射對(duì)微球進(jìn)行表征。兩種方法制備的微球均為球狀或橢球狀,離子凝聚法微球平均粒徑為1.17±0.15㎜,骨

13、架結(jié)構(gòu)完整,Cmi的橫切面上可見(jiàn)到大量FA細(xì)小微晶,而LICMi的橫切面上無(wú)藥物微晶可見(jiàn),脂質(zhì)體以完整的球形分布于微球的骨架中。乳化交聯(lián)法微球平均粒徑為123.754±15.74μm,Cme表面較光滑、致密,LICMe表面殘缺不完整,有較多孔隙,這是乳化交聯(lián)法微球突釋效應(yīng)明顯的重要原因之一。Cmi的DSC圖譜中FA在170℃的吸熱峰明顯,X射線衍射圖譜中FA的結(jié)晶衍射峰明顯,證實(shí)藥物仍以微晶狀態(tài)分布于微球中；Cme的圖譜中FA的吸熱峰或

14、結(jié)晶衍射峰消失,說(shuō)明藥物以無(wú)定形態(tài)分布于微球中。兩種方法制備的LICM中FA吸熱峰或結(jié)晶衍射峰都消失。結(jié)合釋放結(jié)果推知,LICM的結(jié)構(gòu)為藥物包封于脂質(zhì)體內(nèi),脂質(zhì)體再完整的分布于殼聚糖微球中。
　　 4.FA-LICM的體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)
　　 以SD大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行了體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究。大鼠灌胃給予FA原料藥、FA-Cmi和FA-LICMi三種制劑后定時(shí)取血,甲醇沉淀蛋白后,以香豆素為內(nèi)標(biāo),甲醇-0.3％醋酸溶液(42:58)

15、為流動(dòng)相,HPLC法320 nm檢測(cè)血漿中的FA含量,計(jì)算血藥濃度,DAS程序計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。FA-LICM的tmax、MRT、t1/2分別為2.5±0.354h、7.487±O.248h和7.818±1.161h,較原料藥的O.15±0.038h、1.365±0.091h和1.992±0.491h,FA.CM的1±0.354h、4.17l±O.149h和4.857±O.997h都有所延長(zhǎng)；其AUC為18.331±2.846ug·L-1