胃靈顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、中藥是中華民族的瑰寶，中成藥是是經(jīng)過幾千年的中國(guó)古代中醫(yī)藥專家創(chuàng)建的一個(gè)醫(yī)療實(shí)踐的方劑精華，它通過辯證論治，調(diào)節(jié)機(jī)體陰陽平衡，達(dá)到標(biāo)本兼治的目的。因此，對(duì)中成藥建立既符合我國(guó)中醫(yī)藥特色、又能讓國(guó)際社會(huì)認(rèn)可的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系,是我國(guó)實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化、走向國(guó)際市場(chǎng)的關(guān)鍵所在。
　　胃靈顆粒方劑來源于具有一百四十余年歷史的胡慶余堂國(guó)藥老店選用的浙江名醫(yī)驗(yàn)方，由炙甘草750g、海螵蛸750g、炒白芍600g、炒白術(shù)400g、延胡索400g、

2、黨參150g六味中藥水煎提取加適量糊精制成1000g顆粒分裝制得，每袋裝5g。其功效主要為益氣、健脾，斂酸、止痛。在臨床中常被運(yùn)用于脾氣虛、胃氣虛以及肝胃不合所引起的胃脘疼痛、泛吐酸水以及胃潰瘍及十二指腸潰瘍臨床癥候。上市五十多年以來，以其確切顯著的療效贏得廣大患者認(rèn)可，是臨床常用藥物。
　　近些年來，隨著科技進(jìn)步和藥學(xué)工作者的辛勤努力，中藥制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)得到了較大提高，但任務(wù)十分艱巨，部分研究開發(fā)能力較弱的藥品生產(chǎn)企業(yè)仍有一

3、些品種的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)停留在原有水平。胃靈顆粒現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第六冊(cè)(1992年版)，經(jīng)在國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局網(wǎng)站上查詢，全國(guó)有42家藥品生產(chǎn)企業(yè)具有批準(zhǔn)文號(hào)。胃靈顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只規(guī)定了外觀性狀及粒度、水分、溶化性、裝量差異檢查等顆粒劑的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目，處方中主藥味的真?zhèn)舞b別、含量測(cè)定等質(zhì)量控制項(xiàng)目均是空白，無法達(dá)到“安全有效，質(zhì)量可控”的基本要求。因此，亟需對(duì)其質(zhì)量控制方法進(jìn)行研究，提高該藥的

4、質(zhì)量控制水平。
　　方中炙甘草補(bǔ)脾益氣、緩急止痛、兼具調(diào)和諸藥，海螵蛸制酸止痛、收斂止血，共為君藥；炒白芍養(yǎng)血斂陰、柔肝止痛為臣藥；延胡索活血行氣止痛，炒白術(shù)健脾益氣、燥濕利水，佐助君藥、臣藥發(fā)揮作用；使以黨參補(bǔ)脾養(yǎng)胃、健運(yùn)中氣。諸藥合用，共奏補(bǔ)氣健脾，制酸止痛之功效。本課題對(duì)胃靈顆粒處方中六味藥全部進(jìn)行了真?zhèn)舞b別研究，成功地建立了五個(gè)藥味的鑒別方法，對(duì)君藥炙甘草、臣藥炒白芍進(jìn)行了含量測(cè)定研究并建立了可靠的方法，使其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)得

5、到有效提升，基本達(dá)到了質(zhì)量可控目的，保證了藥物療效的穩(wěn)定。
　　目的：
　　1．建立胃靈顆粒處方中主要藥味的鑒別方法，以鑒別其藥品的真?zhèn)巍?br>　　2．建立胃靈顆粒中君藥（炙甘草）、臣藥（炒白芍）特征性有效成分的含量測(cè)定方法，以控制其藥品質(zhì)量。
　　方法：
　　1.鑒別
　　(1)采用薄層色譜法（TLC），分別建立胃靈顆粒中炙甘草、炒白芍、延胡索、炒白術(shù)的薄層色譜鑒別方法。
　　采用硅膠GF254薄

6、層板，以Water-Ethyl acetate-Chloroform(2:7:13)為展開劑，以甘草對(duì)照藥材、甘草苷對(duì)照品為對(duì)照，對(duì)炙甘草進(jìn)行鑒別；
　　采用硅膠G薄層板，展開劑使用Chloroform-Ethyl acetate–Methanol-Methane acid(4:0.5:1:0.2)，以白芍對(duì)照藥材、芍藥苷對(duì)照品為對(duì)照，對(duì)炒白芍進(jìn)行鑒別；
　　采用硅膠GF254薄層板，以Methylbenzene-Aceto

7、ne(9:2)為展開劑，以延胡索對(duì)照藥材、延胡索乙素對(duì)照品為對(duì)照，對(duì)延胡索進(jìn)行鑒別；
　　采用硅膠GF254薄層板，以Cyclohexane-Ethyl acetate(7:3)為展開劑，以白術(shù)對(duì)照藥材為對(duì)照，對(duì)炒白術(shù)進(jìn)行鑒別。
　　(2)采用理化方法鑒別海螵蛸。海螵蛸中含碳酸鈣85％以上，是制酸作用的主要成分。采用加稀鹽酸與碳酸鈣反應(yīng)產(chǎn)生泡沸，使氫氧化鈣試液變渾濁，以鑒別碳酸鹽；取反應(yīng)后的濾液進(jìn)行鈣鹽的鑒別試驗(yàn)(顯磚紅色火

8、焰反應(yīng)；與草酸銨試液生成白色沉淀)，建立海螵蛸的鑒別方法。
　　2．含量測(cè)定
　　采用波長(zhǎng)切換高效液相色譜法(HPLC)，建立同時(shí)測(cè)定胃靈顆粒中甘草苷和芍藥苷的含量的方法。色譜條件：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.1%冰乙酸(19:81)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)甘草苷為276 nm、芍藥苷為230 nm。
　　結(jié)果：
　　1.薄層色譜法分別鑒別胃靈顆粒中炙甘草、炒白芍、延胡索、炒白術(shù)，所建立的薄層色譜方

9、法，均展開效果良好，主斑點(diǎn)清晰且與對(duì)照藥材及對(duì)照品的相應(yīng)位置一致，分離度好，陰性對(duì)照無干擾。炙甘草薄層色譜中，甘草苷的Rf值為0.54；炒白芍薄層色譜中，芍藥苷的Rf值為0.47；延胡索薄層色譜中，延胡索乙素的Rf值為0.60；炒白術(shù)薄層色譜中，兩個(gè)特征主斑點(diǎn)的Rf值分別為0.76與0.84。
　　利用海螵蛸中含碳酸鈣85%以上的特征性成分，采用理化反應(yīng)鑒別鈣鹽、碳酸鹽，陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果直觀。
　　2．采用波長(zhǎng)切換同時(shí)測(cè)

10、定胃靈顆粒中甘草苷和芍藥苷的含量，所建立的高效液相色譜法，分離度好，理論板數(shù)高，方法科學(xué)，結(jié)果可靠。甘草苷含量的線性范圍為0.3939~3.939μg·mL-1，r＝0.9999，平均加樣回收率為99.9%，RSD=2.1%(n＝6)，重復(fù)性RSD＝1.1%（n＝6)，中間精密度RSD＝1.4%(n=6)，能被定量測(cè)定的最低量為3.854ng；芍藥苷含量的線性范圍為0.4061~4.061μg·mL-1，r＝0.9999，平均加樣回收率

11、為101.4%，RSD=2.2%(n＝6)，重復(fù)性RSD＝0.6%（n＝6)。中間精密度RSD＝0.8%(n=6)，能被定量測(cè)定的最低量4.529ng。隨機(jī)考察3家藥品生產(chǎn)企業(yè)共14批胃靈顆粒，每袋甘草苷的含量在5.60~6.85mg，每袋芍藥苷的含量在9.75~12.95mg。14批胃靈顆粒中甘草苷與芍藥苷的含量分別在1.12~1.27 mg/g，1.95~2.59 mg/g。
　　結(jié)論：
　　1．所建立的分別鑒別胃靈顆粒

12、中的炙甘草、炒白芍、延胡索、炒白術(shù)薄層色譜法，系統(tǒng)分離度良好，主斑點(diǎn)清晰，專屬性強(qiáng)，經(jīng)多批次反復(fù)試驗(yàn)，結(jié)果的重現(xiàn)性、耐用性好，均能準(zhǔn)確的定性其真?zhèn)?；所建立的理化反?yīng)方法鑒別海螵蛸，專屬性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果直觀，耐用性好。上述方法均可作為胃靈顆粒的真?zhèn)舞b別控制標(biāo)準(zhǔn)。
　　2．所建立的波長(zhǎng)切換高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定胃靈顆粒中甘草苷、芍藥苷的含量，按當(dāng)今實(shí)行工藝制備的陰性樣品無干擾，具備良好的專屬性和較高的準(zhǔn)確度；對(duì)不同廠家、不同批號(hào)多