胡黃連苷II抑制線粒體細(xì)胞色素C信號通路發(fā)揮神經(jīng)保護作用.pdf

1、目的：急性腦血管疾病的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐漸上升趨勢，然其發(fā)病機制尚不十分清楚，因而缺乏相應(yīng)的有效治療措施。本文旨在探討胡黃連苷II通過作用于線粒體細(xì)胞色素C（CytC）信號通路對腦缺血/再灌注損傷發(fā)揮神經(jīng)保護作用的機制。
　　方法：成年健康雄性Wistar大鼠128只，按隨機數(shù)字表法分為假手術(shù)組、模型組、胡黃連苷II組、抑制劑組、抑制劑+胡黃連苷II組、激動劑組、激動劑+胡黃連苷II組、溶媒（DMSO）組。實驗選用CytC選擇性激動劑

2、蒼術(shù)苷（Atr）和特異性抑制劑環(huán)孢素（CsA）作為工具藥，胡黃連苷II作為治療藥物，采用改良Longa線栓法制備大鼠腦缺血2h/再灌注24h模型。大鼠腦缺血/再灌注24h后行改良神經(jīng)功能學(xué)評分（mNSS）；TTC染色法檢測大鼠腦梗死體積；HE染色法檢測大鼠神經(jīng)細(xì)胞損傷情況；原位末端標(biāo)記方法（TUNEL）檢測缺血/再灌注損傷后大鼠皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的情況；電鏡觀察線粒體超微結(jié)構(gòu)變化；ELISA法檢測大鼠缺血區(qū)腦組織活性氧（ROS）的含量；

3、免疫組織化學(xué)法和Western blot法檢測再灌注損傷區(qū)CytC、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠腦缺血/再灌注損傷后呈現(xiàn)出改良神經(jīng)功能學(xué)評分升高，TTC染色示梗死區(qū)面積較明顯，HE結(jié)果顯示大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞損傷程度比較嚴(yán)重，TUNEL結(jié)果顯示神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量增加，線粒體結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重，ELISA法結(jié)果顯示大鼠腦組織中ROS含量升高；免疫組織化學(xué)和Western blot結(jié)果

4、顯示CytC、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達(dá)量均較假手術(shù)組升高（P＜0.05）。與模型組相比，胡黃連苷II組大鼠mNSS神經(jīng)學(xué)評分及腦梗死體積降低，HE結(jié)果顯示大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞損傷程度有所減輕，TUNEL結(jié)果示神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量減少，線粒體損傷減輕，腦組織中ROS含量下降；免疫組織化學(xué)和Western blot結(jié)果顯示CytC、Caspase-9和Caspase-3蛋白表達(dá)量均較模型組顯著降低（P＜0.05）。CsA組與胡