褪黑素(MT)、Nrf2、HO-1在子癇前期中的表達(dá)及意義.pdf

1、子癇前期是一種妊娠特發(fā)性疾病，是造成不良妊娠結(jié)局的主要原因，其發(fā)病機(jī)制尚不明確，目前公認(rèn)的為“二階段”學(xué)說，第一階段為發(fā)生在孕早期的潛在病理改變期，主要指子宮螺旋小動(dòng)脈重鑄不良導(dǎo)致胎盤淺著床，第二階段為孕中晚期的臨床期。從一階段發(fā)展到二階段的過程中，機(jī)體需經(jīng)歷一系列病理生理改變，其主要的作用因素為氧化應(yīng)激及其所導(dǎo)致的血管內(nèi)皮損傷。褪黑素(melatonin，MT)是一種重要的吲哚類神經(jīng)內(nèi)分泌激素，是重要的抗氧化應(yīng)激物質(zhì)。它可以直接清除氧

2、自由基和氮自由基，也可以通過受體依賴途徑發(fā)揮作用。在離體急性肺損傷、腦缺血再灌注損傷、化學(xué)藥物導(dǎo)致的腎損傷的動(dòng)物模型中研究發(fā)現(xiàn)，MT主要通過Nrf2/ARE/HO-1通路發(fā)揮其抗氧化應(yīng)激的作用。目前研究發(fā)現(xiàn)，MT在子癇前期產(chǎn)婦外周血中表達(dá)量較正常產(chǎn)婦顯著降低，提示MT在子癇前期發(fā)病中的重要作用，然而其具體的作用機(jī)制及相關(guān)通路尚不明確，既往研究顯示在子癇前期產(chǎn)婦外周血中Nrf2、HO-1表達(dá)也均存在顯著下降的現(xiàn)象。因此，本實(shí)驗(yàn)擬通過測量子

3、癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中MT、Nrf2、HO-1三種物質(zhì)的表達(dá)含量及外周血中MT的含量，初步探討三者的相關(guān)性及其對子癇前期從一階段向二階段發(fā)展的意義。
　　第一章:子癇前期患者胎盤及外周血中褪黑素(melatonin，MT)的表達(dá)
　　目的:研究子癇前期產(chǎn)婦胎盤及外周血中MT含量的變化，并分析二者之間的相關(guān)性。探討MT對子癇前期發(fā)病的關(guān)系。
　　方法:1.選擇2013年7月至2014年3月在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院診斷為子癇前期

4、并住院分娩的單胎產(chǎn)婦25例，其中子癇前期輕度組10例，重度組15例，并選正常產(chǎn)婦15例作為妊娠對照組，門診正常體檢女性15例作為正常對照組。
　　2.門診入選對象于就診當(dāng)日空腹抽取外周靜脈血分離血清保存標(biāo)本，住院分娩對象于手術(shù)當(dāng)日6時(shí)空腹抽取外周血，均采取子宮下段橫切口剖宮產(chǎn)終止妊娠，胎盤娩出后取胎盤組織1 cm3，-80℃冰箱保存。
　　3.選用Elisa法檢測四組研究對象外周血MT蛋白的表達(dá)，Western blot法測

5、量胎盤組織中MT蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:Elisa:未孕女性MT表達(dá)水平為6.00±0.53pg/ml，正常妊娠產(chǎn)婦為59.38±2.92pg/ml，子癇前期輕度產(chǎn)婦為38.43±1.50pg/ml，子癇前期重度產(chǎn)婦為24.84±2.58pg/ml，每兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Western blot:正常妊娠產(chǎn)婦胎盤中MT/actin為0.37±0.04，子癇前期輕度組為0.26±0.04，重度組為0.09±0

6、.03，每兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。正常產(chǎn)婦、子癇前期輕度、子癇前期重度三組樣本中胎盤組織和外周血MT含量正相關(guān)(P=0.96)。
　　結(jié)論:正常妊娠產(chǎn)婦較未孕女性外周血MT含量顯著升高，提示其在正常妊娠的抗氧化應(yīng)激中具有一定的作用，而在子癇前期中，產(chǎn)婦胎盤組織及外周血MT含量較正常產(chǎn)婦顯著降低，且隨病情嚴(yán)重程度進(jìn)一步下降，MT表達(dá)的降低可能是導(dǎo)致機(jī)體抗氧化應(yīng)激能力降低的原因之一，是子癇前期病理改變的影響因素之一

7、;正常產(chǎn)婦及子癇前期產(chǎn)婦外周血MT的含量與胎盤組織中MT含量正相關(guān)，提示胎盤可能為孕期外周血MT主要來源。
　　第二章:子癇前期胎盤組織中MT、Nrf2、HO-1蛋白的表達(dá)
　　目的:研究子癇前期患者胎盤組織中MT與Nrf2、HO-1蛋白的的相關(guān)性，探討三者在子癇前期病理改變中的作用。
　　方法:1.選擇2013年7月至2014年3月在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院診斷為子癇前期并住院分娩的單胎孕婦25例，其中子癇前期輕度組10例

8、，重度組15例，并選正常妊娠產(chǎn)婦15例作為妊娠對照組。
　　2.所有入選對象均采取剖宮產(chǎn)終止妊娠，胎盤娩出后取新鮮胎盤組織1×1×1cm3，液氮轉(zhuǎn)移，-80℃冰箱保存。
　　3.選用Western blot法測量胎盤組織中Nrf2、HO-1蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:正常產(chǎn)婦胎盤組織中Nrf2/actin為0.31±0.03，子癇前期輕度為0.18±0.06，重度組為0.07±0.02，每兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0

9、5)。正常產(chǎn)婦胎盤組織中HO-1/actin為0.34±0.04，子癇前期輕度組為0.02±0.04，重度組為0.08±0.03，每兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)合第一章實(shí)驗(yàn)結(jié)果，正常產(chǎn)婦及子癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中MT、Nrf2、HO-1的表達(dá)具有相關(guān)性。
　　結(jié)論:子癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中Nrf2、HO-1較正常產(chǎn)婦顯著降低，且隨疾病嚴(yán)重程度進(jìn)一步下降，二者變化之間顯著正相關(guān)，提示子癇前期產(chǎn)婦胎盤組織中可能存在Nrf2/