對(duì)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后睪丸細(xì)胞凋亡的觀察——?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中文摘要攀丸扭轉(zhuǎn)是一種泌尿外科的急癥，好發(fā)于青少年。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究表明，既使扭轉(zhuǎn)翠丸得到復(fù)位，不發(fā)生梗死，灌注血流與扭轉(zhuǎn)前血流平均值相同，其后果也能導(dǎo)致永久性的精子生成缺乏。如同心臟、腦、肝、腎、肺、胃腸道等器官的缺血一再灌注(IschemiaReperfusion，簡(jiǎn)稱IR)損傷一樣，扭轉(zhuǎn)后的翠丸也發(fā)生IR損傷。IR損傷后常產(chǎn)生組織細(xì)胞的凋亡。其具體機(jī)制尚未完全闡明，可能與氧自由基損傷、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、能量衰竭、白細(xì)胞激活與內(nèi)皮細(xì)胞

2、損傷等相關(guān)。臨床上，在心、肺、腦等器官發(fā)生IR時(shí)，應(yīng)用氧自由基清除劑及鈣離子通道拮抗劑，可以減輕或消除IR損傷的程度。鑒于對(duì)翠丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后，IR損傷時(shí)發(fā)生時(shí)翠丸細(xì)胞凋亡情況研究較少，我們建立動(dòng)物翠丸扭轉(zhuǎn)模型，觀察扭轉(zhuǎn)復(fù)位后翠丸細(xì)胞的凋亡情況，及應(yīng)用氧自由基清除劑及鈣離子通道拮抗劑后對(duì)減輕翠丸IR損傷的作用。實(shí)驗(yàn)材料一、動(dòng)物模型制作及分組:選青春期前雄性日本大耳白兔20只，體重9001100g，月齡23月。隨機(jī)分為四組，每組五只。麻醉后，

3、取左或右側(cè)下腹縱行切口，切開(kāi)皮膚、翠丸鞘膜突，將翠丸提出體外，按以下方法實(shí)驗(yàn):第一組(對(duì)照組):將皋丸沿縱軸向內(nèi)側(cè)旋轉(zhuǎn)720“后立即復(fù)位。術(shù)畢。第二組(扭轉(zhuǎn)組):同法將翠丸沿縱軸向內(nèi)側(cè)旋轉(zhuǎn)7200，還納翠丸，維持此狀態(tài)，縫合切口。兩小時(shí)后手術(shù)復(fù)位。第三組(抗壞血酸組):操作同第二組，于復(fù)位前15分鐘經(jīng)耳緣靜脈注入抗壞血酸(1留Kg體重，加無(wú)菌鹽水至lOml)，靜注速度為8m1hr，持續(xù)靜注75分鐘。即復(fù)位后二、翠丸生精細(xì)胞凋亡情況:對(duì)照

4、組及未手術(shù)側(cè)中僅見(jiàn)少量精原細(xì)胞發(fā)生凋亡。扭轉(zhuǎn)組手術(shù)側(cè)中見(jiàn)則精原細(xì)胞中分布有多數(shù)凋亡細(xì)胞。對(duì)照組手術(shù)側(cè)與非手術(shù)側(cè)翠丸組織的凋亡指數(shù)分別為2.60士1.01，3.92土0.92，兩者無(wú)顯著性差異扭轉(zhuǎn)組手術(shù)側(cè)、非手術(shù)側(cè)的凋亡指數(shù)分別是7.92士1.294.64士1.66，兩者差異顯著(p0.01)扭轉(zhuǎn)組手術(shù)側(cè)翠丸生精細(xì)胞凋亡指數(shù)均值(7.92士1.29)較對(duì)照組手術(shù)側(cè)翠丸組織AI均值(2.60士1.01)顯著升高(p0.01)。扭轉(zhuǎn)組非手術(shù)側(cè)

5、翠丸生精細(xì)胞凋亡指數(shù)均值(4.64士1.66)較對(duì)照組非手術(shù)側(cè)辜丸組織AI均值(2.60士1.01)無(wú)顯著性差異?？箟难峤M手術(shù)側(cè)及維拉帕米組手術(shù)側(cè)翠丸組織的凋亡指數(shù)分別是4.12士0.734.08土0.88，均較扭轉(zhuǎn)組手術(shù)側(cè)翠丸凋亡指數(shù)(7.92士1.29)有顯著下降。三、翠丸病理組織學(xué)所見(jiàn):對(duì)照組翠丸曲細(xì)精管完整，精原細(xì)胞、支持細(xì)胞形態(tài)、排列無(wú)明顯異常。扭轉(zhuǎn)翠丸生精細(xì)胞排列紊亂，部分精原細(xì)胞呈現(xiàn)明顯的染色質(zhì)濃縮和邊聚現(xiàn)象。用藥組見(jiàn)到

6、扭轉(zhuǎn)翠丸中精原細(xì)胞核濃聚現(xiàn)象較扭轉(zhuǎn)組扭轉(zhuǎn)翠丸為少。四、翠丸重量經(jīng)統(tǒng)計(jì)在各組之間及同組兩側(cè)之間無(wú)顯著性差異。討論一、翠丸扭轉(zhuǎn)IR損傷后細(xì)胞凋亡情況:我們觀察到幼兔翠丸扭轉(zhuǎn)缺血2小時(shí)再灌注48小時(shí)，翠丸精原細(xì)胞凋亡指數(shù)為(7.92士1.29)，比對(duì)照組(2.60士1.01)顯著增高。發(fā)生凋亡的部位主要分布在精原細(xì)胞，而支持細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞則未見(jiàn)凋亡現(xiàn)象。這提示翠丸扭轉(zhuǎn)后生精能力受損是由于生精細(xì)胞的陸續(xù)凋亡產(chǎn)生的。同時(shí)扭轉(zhuǎn)翠丸的1正組織切片上看