甲巰咪唑分子印跡仿生酶聯(lián)免疫分析方法建立.pdf

1、近年來，動(dòng)物性食品的安全性問題日益被世界所重視，由于我國(guó)的食品安全體系尚在建立中，一些不法生產(chǎn)者和經(jīng)營(yíng)企業(yè)在飼料中非法使用國(guó)家禁止或者不按照規(guī)定使用添加劑，有些甚至濫用導(dǎo)致畜產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)的殘留增加、嚴(yán)重超標(biāo)等現(xiàn)象突出，嚴(yán)重影響了人們的身體健康。甲巰咪唑具有增進(jìn)蛋白質(zhì)代謝的作用從而被非法地作為飼料添加劑使用，食用殘留有甲巰咪唑的動(dòng)物性食品后會(huì)在人體內(nèi)蓄積，對(duì)人體產(chǎn)生毒副作用。已有的文獻(xiàn)中尚未發(fā)現(xiàn)用分子印跡技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)相結(jié)合

2、來檢測(cè)甲巰咪唑的殘留量的報(bào)道，本論文基于分子印跡技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附法，針對(duì)動(dòng)物性食品中的甲巰咪唑殘留的檢測(cè)，建立了價(jià)格低廉、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。
　　 本文采用本體聚合技術(shù)，以甲巰咪唑?yàn)槟０宸肿?，甲基丙烯酸為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，在96孔酶標(biāo)板上直接紫外引發(fā)聚合制備了對(duì)甲巰咪唑具有選擇識(shí)別能力的分子印跡聚合物，且對(duì)聚合反應(yīng)條件進(jìn)行了詳細(xì)討論;同時(shí)對(duì)印跡聚合物的平衡結(jié)合，吸附動(dòng)力學(xué)和選擇性能力進(jìn)行了考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)

3、果表明，合成的聚合物對(duì)甲巰咪唑具有選擇性高、傳質(zhì)速度和結(jié)合平衡速度快等諸多優(yōu)點(diǎn)。印跡聚合物的飽和吸附容量Qmax為1.51μg well-1;在動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)中，吸附約40 min即可達(dá)到吸附平衡。
　　 以該印跡膜作為仿生抗體，優(yōu)化酶聯(lián)免疫分析條件，建立了直接競(jìng)爭(zhēng)仿生酶聯(lián)免疫分析方法(BELISA)。該方法對(duì)甲巰咪唑具有很高的選擇性，對(duì)2-巰基咪唑等兩種結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)率為1.1％-1.3％，靈敏度和最低檢出限分別為70±4μ

4、g L-1和0.9±0.04μg L-1。
　　 為驗(yàn)證所建立方法的實(shí)用性，本文還同時(shí)對(duì)動(dòng)物尿液樣品和豬肉樣品中的痕量甲巰咪唑的殘留進(jìn)行了檢測(cè)分析。通過對(duì)檢測(cè)為空白的尿液樣品進(jìn)行濃度為50，100，150μg L-1的添加，對(duì)檢測(cè)為空白的豬肉樣品進(jìn)行10，20，30μg kg-1的添加，以所建立的分析方法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果在尿液樣品中各個(gè)添加濃度下樣品中甲巰咪唑的回收率為90.0％-95.0％，在豬肉樣品中的回收率為77.0％-89