大足黑山羊妊娠不同階段胎盤線粒體結(jié)構(gòu)及能量代謝的比較.pdf

1、山羊胎盤屬于子葉型胎盤（cotyledons placenta），具有造血、運輸、代謝、內(nèi)分泌、屏障和免疫等許多重要功能。胎盤循環(huán)建立后，胎兒通過胎盤子葉獲得營養(yǎng)物質(zhì)，而胎盤子葉細胞中的線粒體通過氧化磷酸化產(chǎn)生ATP，為母-胎的營養(yǎng)運輸提供動力。因此，胎盤線粒體發(fā)揮正常功能是保證胎兒生長發(fā)育，進而維持妊娠的關(guān)鍵。若胎盤組織中線粒體功能不足則會導(dǎo)致胎盤物質(zhì)運輸障礙，胎兒體重降低，甚至引發(fā)宮內(nèi)生長遲緩。目前對山羊妊娠過程中胎兒及胎盤發(fā)育的研

2、究相對匱乏，尤其是在胎盤線粒體結(jié)構(gòu)及能量代謝的研究上幾近空白。
　　大足黑山羊是具有高繁性能的山羊遺傳資源，主要分布于重慶大足及周邊地區(qū)。本實驗前期研究結(jié)果表明大足黑山羊產(chǎn)羔數(shù)與胎盤效率呈正相關(guān)趨勢，但在妊娠過程中胎盤效率的變化規(guī)律尚不清楚，同時也缺乏對線粒體結(jié)構(gòu)和能量代謝方面的研究，這些問題都限制了我們了解大足黑山羊妊娠發(fā)育過程及胎盤物質(zhì)轉(zhuǎn)運功能。因此本研究通過測定妊娠不同階段大足黑山羊胎兒及胎盤發(fā)育情況，對線粒體結(jié)構(gòu)及能量代謝

3、進行比較，以此探究大足黑山羊妊娠過程中胎盤效率及胎盤線粒體結(jié)構(gòu)和功能的變化，為深層次解析胎盤在維持大足黑山羊胎兒正常妊娠過程中的作用提供參考。
　　本試驗以妊娠20、25、30、60、90和120d的大足黑山羊胎兒及胎盤為研究對象，采用HE染色切片、超顯微透射電鏡、酶聯(lián)反應(yīng)等方法，對大足黑山羊胎盤發(fā)育、線粒體結(jié)構(gòu)和能量代謝進行研究；采用實時熒光定量PCR方法，比較胎盤線粒體基因的表達量變化。主要研究結(jié)果如下：
　　1、試驗觀

4、察妊娠早期的胎盤發(fā)現(xiàn)其分化快于胎兒，并在妊娠30d時已延伸至雙側(cè)子宮角。在妊娠60至90d，胎兒以13.09g/d的速度增重，妊娠120d后胎兒以34.911g/d的速度增重。胎盤效率隨著妊娠時間而逐漸增長，由妊娠20d時的0.194升高至妊娠120d時的2.692，并且差異極顯著（P＜0.01）。通過組織切片觀察胎盤結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，妊娠20、25和30d的胎盤細胞數(shù)量增多，密度增加，胎盤逐漸形成腔室結(jié)構(gòu)。在妊娠60d后，胎盤子葉絨毛數(shù)量增多

5、，長度增加，并逐漸深入子宮阜肌層。
　　2、通過超微電鏡觀察線粒體結(jié)構(gòu)變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胎盤線粒體形態(tài)完整，數(shù)量隨著妊娠進行而增多并大量聚集在子葉絨毛處附近。
　　3、試驗對胎盤子葉組織中線粒體細胞色素C氧化酶、琥珀酸脫氫酶、Ca++-Mg++-ATP酶和Na+-K+-ATP酶的活性測定發(fā)現(xiàn)，在妊娠過程中胎盤子葉線粒體酶活性極顯著增加（P＜0.01），其中妊娠90至120d的上升趨勢明顯，表明線粒體能量代謝逐漸增強。
　　

6、4、在妊娠25d的胎盤子葉及子宮阜中基因COXIV、SDHA、TFAM、PGC-1ɑ、NRF-1的表達量達到高峰，至妊娠30d則顯著降低，其中線粒體COXIV基因在子葉中的表達量由0.84降至0.09，差異極顯著（P＜0.01），核基因PGC在子葉中的表達量由1.21降至0.665，核基因NRF在子葉中的表達量由1.06降至0.223，核基因TFAM在子宮阜中的表達量由3.07降至1.32。妊娠60d后胎盤循環(huán)已建立，線粒體相關(guān)基因在子