進(jìn)境多年生黑麥草和白三葉種帶真菌多樣性研究.pdf

1、分類號(hào)：分類號(hào)：密級(jí)：密級(jí)：研究生學(xué)位論文論文題目論文題目(中文中文)進(jìn)境多年生黑麥草和白三葉種帶真菌多樣性進(jìn)境多年生黑麥草和白三葉種帶真菌多樣性研究研究論文題目論文題目(外文外文)AnalysisoffungaldiversityofimptedseedsofLoliumperenneTrifoliumrepens研究生姓名研究生姓名雷婭紅雷婭紅學(xué)科、專業(yè)學(xué)科、專業(yè)植物保護(hù)學(xué)物保護(hù)學(xué)植物病理學(xué)植物病理學(xué)研究方向研究方向草業(yè)微生物草業(yè)微

2、生物學(xué)位級(jí)別學(xué)位級(jí)別碩士導(dǎo)師姓名、職稱導(dǎo)師姓名、職稱李春杰李春杰教授教授論文工作論文工作起止年月起止年月2014年9月至月至2017年5月論文提交日期論文提交日期2017年5月論文答辯日期論文答辯日期2017年5月學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期2017年6月校址：甘肅省蘭州市校址：甘肅省蘭州市I進(jìn)境多年生黑麥草進(jìn)境多年生黑麥草和白三葉種帶真菌多樣性研究和白三葉種帶真菌多樣性研究中文摘要中文摘要我國(guó)每年需進(jìn)口大量草坪草和牧草種子，而草種攜帶的部

3、分病原真菌對(duì)種子發(fā)芽、種苗活力具有一定負(fù)作用，嚴(yán)重影響農(nóng)業(yè)發(fā)展。因此，對(duì)其進(jìn)行快速檢測(cè)鑒定以及系統(tǒng)研究極其重要。本研究比較了3種基因組DNA提取方法，進(jìn)一步利用高通量測(cè)序技術(shù)分析了來(lái)源于不同國(guó)家的4份多年生黑麥草(Loliumperenne)和5份白三葉(Trifoliumrepens)種子攜帶真菌的多樣性，并將其與傳統(tǒng)分離鑒定結(jié)果進(jìn)行了比較；同時(shí)基于DNA條形碼技術(shù)對(duì)重要植物病原真菌鐮刀菌(Fusariumspp.)進(jìn)行快速檢測(cè)鑒定研

4、究。主要研究結(jié)果如下：1.采用CTAB法、尿素法和試劑盒法3種方法提取基因組DNA，比較分析各方法的提取效率。結(jié)果表明，尿素法提取的基因組OD260280值接近于1.80，蛋白質(zhì)抽提效果較好，含雜質(zhì)較少，濃度最高達(dá)到886.5ngμL1，電泳檢測(cè)結(jié)果條帶明亮單一、無(wú)拖尾現(xiàn)象，完成過(guò)程步驟少、耗時(shí)短，優(yōu)于其他2種方法。2.利用高通量測(cè)序技術(shù)分析了來(lái)源于不同國(guó)家的4份多年生黑麥草(L.perenne)和5份白三葉(T.repens)種子攜帶

5、真菌的多樣性。結(jié)果表明，不同來(lái)源種子攜帶真菌差異較大，主要攜帶真菌類群為子囊菌門(omycota)和擔(dān)子菌門(Basidiomycota)，占真菌群落的98.3%以上；其中丹麥多年生黑麥草(DH)、美國(guó)多年生黑麥草(MH)、加拿大多年生黑麥草(JH)、新西蘭多年生黑麥草(XH)分別鑒定了69、40、75、41個(gè)屬，主要為Davidiella、麥角菌屬(Claviceps)和隱球菌屬(Cryptococcus)等；澳大利亞白三葉(AB)、

6、丹麥白三葉(DB)、美國(guó)白三葉(MB)、阿根廷白三葉(TB)、新西蘭白三葉(XB)分別鑒定了52、47、44、65、50個(gè)屬，主要為Davidiella和鏈格孢屬(Alternaria)等。3.利用傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)合分子標(biāo)記對(duì)進(jìn)境草種攜帶真菌進(jìn)行分離鑒定，結(jié)果表明，9份樣品共檢測(cè)出9屬19種89個(gè)菌株，只分離到了少量的優(yōu)勢(shì)菌群，AB主要攜帶Stemphyliumvesicarium(57.2%)，DB、XB和MH主要攜帶A.infec