圍植入期小鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)及IGFBP-4、IGF-2表達(dá)的研究.pdf

1、目的：①觀察動(dòng)情期非妊娠及圍植入期真孕和假孕小鼠子宮內(nèi)膜的光鏡結(jié)構(gòu)變化特點(diǎn);②觀察動(dòng)情期非妊娠及圍植入期真孕和假孕小鼠子宮內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn);③觀察圍植入期小鼠子宮內(nèi)膜IGFBP-4和IGF-2的表達(dá)分布狀況;④探討IGFBP-4和IGF-2在圍植入期真孕小鼠子宮內(nèi)膜表達(dá)的關(guān)系。
　　方法：以成年未經(jīng)產(chǎn)雌性昆明種小鼠為研究對(duì)象,以動(dòng)情期雌鼠分別與正常雄鼠和輸精管結(jié)扎雄鼠3:1合籠,次晨查到陰栓記作真(假)孕1d。分別在1~8d各將

2、120只真孕和120只假孕小鼠頸椎脫臼處死,剖腹取其子宮并取動(dòng)情期非妊娠小鼠子宮作對(duì)照,4％多聚甲醛固定,分別進(jìn)行HE染色觀察真孕和假孕小鼠子宮內(nèi)膜的光鏡結(jié)構(gòu)變化;電鏡觀察真孕及假孕3~6d小鼠子宮內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)改變;免疫組化SP法檢測(cè)子宮內(nèi)膜IGFBP-4和IGF-2的表達(dá);顯微成像系統(tǒng)拍攝圖像并進(jìn)行計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)分析免疫組化染色結(jié)果。另取120只假孕4d小鼠,手術(shù)開(kāi)腹提取其雙角子宮,一側(cè)注射0.1mL植物油誘導(dǎo)蛻膜反應(yīng),一側(cè)未作

3、任何處理作為對(duì)照,于假孕8d頸椎脫臼處死小鼠,剖腹取其處理側(cè)子宮,4%多聚甲醛固定,分別進(jìn)行HE染色觀察小鼠子宮內(nèi)膜光鏡結(jié)構(gòu)變化,免疫組化檢測(cè)IGFBP-4和IGF-2蛋白的表達(dá),顯微成像系統(tǒng)拍攝圖像分析免疫組化染色結(jié)果。
　　結(jié)果：①HE染色結(jié)果,真孕1~8d小鼠子宮內(nèi)膜呈動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì),植入前期(孕1~3d)固有層腺體增多,腺腔開(kāi)始變得不規(guī)則,出現(xiàn)少量分泌物,血管增生,基質(zhì)細(xì)胞排列疏松、基質(zhì)水腫;植入期(孕4~5d)固有層腺體進(jìn)

4、一步增多,腺腔變得極不規(guī)則,充滿(mǎn)分泌物,血管進(jìn)一步增生、彎曲并呈螺旋狀分布,基質(zhì)細(xì)胞變得十分肥大,內(nèi)膜進(jìn)一步增厚;植入后期(孕6~8d),除具有上述兩期特點(diǎn)外,基質(zhì)細(xì)胞完全增殖分化為蛻膜細(xì)胞,腺體減少。②透射電鏡結(jié)果,真孕3~6d小鼠子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞中分布有大量的各類(lèi)細(xì)胞器,與動(dòng)情非妊娠小鼠相比要豐富的多,尤其是在植入期,腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞中線粒體、高爾基復(fù)合體、粗(滑)面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、分泌顆粒等非常豐富,基質(zhì)細(xì)胞肥大水

5、腫、核大而圓,胞質(zhì)內(nèi)還有豐富的糖原、脂滴及溶酶體;假孕3~6d小鼠子宮內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)變化不甚明顯,只在假孕3~4d出現(xiàn)類(lèi)似于真孕3~4d內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)改變,腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞中分布有大量的細(xì)胞器,較動(dòng)情非妊娠小鼠豐富,假孕5~6d內(nèi)膜變化幾乎與動(dòng)情非妊娠小鼠無(wú)差別。③免疫組化染色結(jié)果,真孕1~8d,IGFBP-4在真孕3d小鼠子宮內(nèi)膜開(kāi)始表達(dá),陽(yáng)性產(chǎn)物主要分布于子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮和基質(zhì)細(xì)胞的胞質(zhì)中,于5~6d表達(dá)最強(qiáng),7~8d

6、表達(dá)減弱;假孕1~8d,IGFBP-4在假孕5d小鼠子宮內(nèi)膜開(kāi)始表達(dá),主要分布于子宮內(nèi)膜腺上皮和腔上皮細(xì)胞胞質(zhì)中,其表達(dá)水平與動(dòng)情未孕期小鼠相似,但在基質(zhì)細(xì)胞不表達(dá);真孕1~8d,IGF-2主要表達(dá)于子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮和基質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)中,5~8d表達(dá)最強(qiáng);假孕1~8d,IGF-2在假孕3d小鼠子宮內(nèi)膜開(kāi)始表達(dá),主要分布于腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)中,其表達(dá)水平與動(dòng)情未孕期小鼠類(lèi)似;IGFBP-4與IGF-2在人工蛻膜化小鼠子宮內(nèi)膜均

7、有表達(dá),主要分布于腺上皮細(xì)胞胞質(zhì)中和植物油誘導(dǎo)后的整個(gè)蛻膜細(xì)胞胞質(zhì)中。
　　結(jié)論：①真孕及假孕1~8d小鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)改變呈動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì),以植入期變化最為明顯;②真孕3~8d小鼠子宮內(nèi)膜持續(xù)表達(dá)IGFBP-4,提示IGFBP-4可能在小鼠胚胎植入中發(fā)揮重要的生理生化作用;③真孕1~8d小鼠子宮內(nèi)膜廣泛表達(dá)IGF-2,提示IGF-2可能在小鼠胚胎植入中發(fā)揮重要的作用;④假孕1~8d小鼠子宮內(nèi)膜IGFBP-4與IGF-2的表達(dá)規(guī)律,