大鼠CFA炎癥模型中MCP-1對(duì)疼痛產(chǎn)生及維持的作用.pdf

1、組織損傷誘導(dǎo)產(chǎn)生的炎性疼痛的治療是臨床上的一個(gè)難題，對(duì)其產(chǎn)生機(jī)制的全面深入的研究是開(kāi)發(fā)更為有效治療方案的重要組成部分。經(jīng)過(guò)這些年的研究積累，人們已發(fā)現(xiàn)有許多機(jī)制參與了炎性疼痛的產(chǎn)生及維持過(guò)程，細(xì)胞因子特別是趨化因子在慢性疼痛中的作用近幾年來(lái)受到了越來(lái)越多的重視，但趨化因子在炎性疼痛中發(fā)揮什么樣的作用還有待進(jìn)一步研究。我們?cè)谕耆ナ献魟?Freund's adjuvant，complete，CFA)誘導(dǎo)產(chǎn)生的炎性疼痛大鼠模型(CFA炎性大

2、鼠)中發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞趨化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)及其受體CCR2在DRG痛覺(jué)神經(jīng)元中的表達(dá)升高，并可直接興奮DRG痛覺(jué)神經(jīng)元；另外，已有的研究表明MCP-1的作用位點(diǎn)不僅在外周痛覺(jué)感受器，還可能作用在脊髓水平，這可能是炎性疼痛長(zhǎng)時(shí)間維持、反復(fù)發(fā)作的重要原因，因此我們?cè)谘芯縈CP-1/CCR2信號(hào)系統(tǒng)直接興奮外周DRG痛覺(jué)神經(jīng)元的基礎(chǔ)上，又進(jìn)一步研究了MCP-1對(duì)脊髓后角

3、膠狀質(zhì)層(substantia gelatinosa,SG)神經(jīng)元突觸傳遞過(guò)程的調(diào)節(jié)作用。我們的研究為尋找炎性疼痛的臨床治療提供了新的作用靶點(diǎn)。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 一、MCP-1對(duì)CFA炎性大鼠痛覺(jué)行為的易化作用
　　 1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，足底注射MCP-1能引起CFA炎性大鼠的自發(fā)性疼痛行為增強(qiáng)并能易化機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏，表現(xiàn)為足底注射MCP-1后，大鼠由于疼痛產(chǎn)生的自發(fā)性后腳懸空時(shí)間增長(zhǎng)，而

4、且在自發(fā)性疼痛行為消失后，其對(duì)機(jī)械刺激的反應(yīng)閾值降低。
　　 二、CFA炎性大鼠DRG中MCP-1及CCR2的表達(dá)量升高
　　 1.熒光實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time PCR)研究結(jié)果表明，CFA炎性大鼠DRG組織中MCP-1的mRNA表達(dá)量升高。
　　 2.Western blot技術(shù)研究結(jié)果表明，CFA炎性大鼠DRG神經(jīng)元中CCR2蛋白表達(dá)量升高。
　　 三、MCP-1直接興奮CFA炎性大鼠DRG

5、痛覺(jué)神經(jīng)元
　　 1.單細(xì)胞全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)研究結(jié)果表明，在MCP-1作用1min后能增強(qiáng)CFA炎性大鼠DRG痛覺(jué)神經(jīng)元的興奮性，表現(xiàn)為神經(jīng)元的去極化，可誘發(fā)動(dòng)作電位產(chǎn)生的閾電流閾值降低，以及相同電流刺激產(chǎn)生的動(dòng)作電位數(shù)目增加；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)MCP-1能夠增大DRG痛覺(jué)神經(jīng)元TTX-S(TTX-sensitive)鈉電流的幅度，并使TTX-S鈉電流激活曲線左移，對(duì)TTX-R(TTX-resistant)鈉電流和鉀電流沒(méi)有調(diào)節(jié)作用

6、。
　　 四、MCP-1增強(qiáng)正常大鼠脊髓后角痛覺(jué)信息傳遞
　　 1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，正常大鼠鞘內(nèi)注射MCP-1可直接誘導(dǎo)產(chǎn)生疼痛行為。
　　 2.脊髓片全細(xì)胞膜片鉗記錄結(jié)果表明，MCP-1能增強(qiáng)距常大鼠脊髓后角膠狀質(zhì)層神經(jīng)元自發(fā)興奮性突觸后電流(spontaneous EPSCs)并減弱自發(fā)抑制性突觸后電流(spontaneous IPSCs)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，MCP-1的這一作用是通過(guò)增強(qiáng)AMPA和NMDA

7、電流并抑制GABA電流實(shí)現(xiàn)的。
　　 綜上所述，我們通過(guò)研究MCP-1/CCR2信號(hào)系統(tǒng)對(duì)CFA炎性大鼠的外周DRG痛覺(jué)神經(jīng)元和正常大鼠脊髓后角膠狀質(zhì)層神經(jīng)元痛覺(jué)信號(hào)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用，表明在炎性疼痛中，MCP-1/CCR2信號(hào)系統(tǒng)通過(guò)增強(qiáng)外周DRG痛覺(jué)神經(jīng)元的興奮性，在疼痛的產(chǎn)生過(guò)程中發(fā)揮了重要作用；而該信號(hào)系統(tǒng)能夠通過(guò)增強(qiáng)正常大鼠脊髓后角膠狀質(zhì)層神經(jīng)元興奮性突觸傳遞，減弱抑制性突觸傳遞，并可直接誘導(dǎo)產(chǎn)生疼痛行為，提示MCP-1/