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1、目的:探討陰離子交換蛋白2(AE2,Anion Exchanger2)在人正常絨毛細(xì)胞和絨癌JAR細(xì)胞中的表達(dá)差異,及該通道蛋白的表達(dá)改變與絨癌發(fā)生的關(guān)系。
方法:⑴人正常絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞的原代培養(yǎng)、純化及鑒定;人絨毛膜癌JAR細(xì)胞株的培養(yǎng)。將原代純化培養(yǎng)的人正常絨毛細(xì)胞設(shè)為正常組,人絨毛膜癌JAR細(xì)胞株設(shè)為絨癌組。⑵以免疫組化法檢測(cè)人正常絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞和絨毛膜癌細(xì)胞株JAR細(xì)胞膜上AE2的表達(dá)。⑶以RT-PCR技術(shù)檢測(cè)人正常絨
2、毛滋養(yǎng)細(xì)胞及絨癌JAR細(xì)胞中AE2mRNA的表達(dá)水平。
結(jié)果:①在正常組中,原代培養(yǎng)的人正常絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞上僅能從顯微鏡中肉眼觀察到AE2的極低表達(dá),以致攝影效果不佳。而在絨癌組中,絨癌JAR細(xì)胞膜上AE2的陽(yáng)性細(xì)胞率為(91.59±12.10)%,遠(yuǎn)高于正常組。②在正常人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞與人絨癌JAR細(xì)胞株中,均檢測(cè)到AE2mRNA的表達(dá)。絨癌組AE2的OD值為(0.85±0.21);正常組AE2的OD值分別為(0.19±0.
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