體外循環(huán)對Th1、Tc1-Th2、Tc2細胞分化影響及其相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的研究.pdf

1、研究表明：體外循環(huán)并發(fā)癥與免疫功能失調(diào)有關(guān)，其內(nèi)在機制目前尚不明確，缺乏有效防治手段。有效調(diào)節(jié)機體免疫系統(tǒng)功能、保持其內(nèi)部平衡，可能是體外循環(huán)并發(fā)癥預防與治療的一種思路。機體的免疫系統(tǒng)主要具有致炎反應、抗炎反應、細胞免疫、體液免疫四個方面的生物學效應，這些效應之間通過復雜的內(nèi)部聯(lián)系保持相互平衡，是機體自身穩(wěn)定的前提，而體外循環(huán)并發(fā)癥的發(fā)生與此系統(tǒng)失衡密切相關(guān)。Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞是T淋巴細胞兩個重要的功能亞群，能分泌多種細

2、胞因子，調(diào)節(jié)免疫應答，對機體免疫防御反應具有顯著的介導、調(diào)節(jié)作用，在移植免疫、抗腫瘤免疫等方面發(fā)揮重要作用。Th1、Tc1細胞分泌IL-2、IFN-γ、TNF-α等致炎因子，介導細胞免疫應答，在抗感染、器官移植排斥反應和自身免疫的誘導過程中起重要作用；Th2、Tc2細胞產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-10等抗炎因子，介導體液免疫，在過敏反應中起主導作用。鑒于Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞顯著的免疫調(diào)節(jié)效應，其細胞分化調(diào)控的研究已成為當

3、前的熱點。目前研究認為：在TH、TC細胞分化過程中，細胞因子是影響Th1、Tc1/Th2、Tc2極性分化的重要調(diào)節(jié)因素，但僅在分化的早期階段發(fā)揮作用。而細胞特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-bet、GATA3可能是決定Th1、TC1/Th2、Tc2極性分化的決定性因素。對體外循環(huán)中Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞亞群變化、調(diào)控分化的細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA3表達狀況進行研究，有助于了解體外循環(huán)并發(fā)癥的發(fā)病機理和探索新的防治方法。

4、 基于上述認識，課題引入Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞亞群做為線索，對其在體外循環(huán)中的變化及與上述免疫學效應的關(guān)系進行系列觀察研究。 研究內(nèi)容分三部分： 1.體外循環(huán)對T淋巴細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、代謝及功能亞群分類的影響。 2.體外循環(huán)對T淋巴細胞介導免疫學效應的影響。 3.轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-bet、GATA3、STAT1、STAT6在體外循環(huán)前后T淋巴細胞內(nèi)的表達變化。 研究結(jié)果： 1.與

5、術(shù)前相比，實驗組T淋巴細胞出現(xiàn)體積變大、胞漿增多、空泡等增生反應的特點；細胞代謝水平升高；T淋巴細胞內(nèi)IL-4mRNA、蛋白表達水平增高，IFN-γmRNA、蛋白表達水平下降。對照組無明顯改變。 2。與術(shù)前相比，體外循環(huán)引起T淋巴細胞凋亡增加，數(shù)量減少；遲發(fā)型超敏反應發(fā)生時間推遲，強度抑制；殺傷腫瘤細胞能力下降；未能觀察到免疫球蛋白水平明顯變化。對照組無明顯改變。 3.與術(shù)前相比，對照組致炎介質(zhì)IL-6表達一過性上調(diào)，抗

6、炎介質(zhì)IL-10無明顯變化；實驗組呈現(xiàn)不同特征：體外循環(huán)引起抗炎介質(zhì)IL-10升高，峰值先于致炎介質(zhì)IL-6；致炎介質(zhì)IL-6峰值仍在術(shù)后4h，術(shù)中及術(shù)后表達水平低于對照組。 4.與術(shù)前相比，實驗組Th1.Tc1特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-betmRNA及上游轉(zhuǎn)錄因子SATA1蛋白核內(nèi)表達下調(diào)，Th2.Tc2特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子GATA3mRNA及上游轉(zhuǎn)錄因子SATA6蛋白核內(nèi)表達上調(diào)；對照組無明顯改變。 研究結(jié)論： 1

7、.體外循環(huán)手術(shù)可致T淋巴細胞出現(xiàn)增生反應，并對Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞亞群的分化狀況產(chǎn)生影響：Th1、Tc1細胞亞群分化數(shù)量減少，Th2、Tc2細胞亞群分化數(shù)量增多。 2.體外循環(huán)手術(shù)對T淋巴細胞介導的細胞免疫功能有抑制效應，誘導機體致炎介質(zhì)IL-6、抗炎介質(zhì)IL-10表達一過性上調(diào)，抗炎介質(zhì)IL-10對致炎介質(zhì)IL-6的表達有抑制效應：Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞亞群的分化狀況，既能客觀反應上述變化，又與之密切

8、相關(guān)，可能是其內(nèi)在調(diào)節(jié)機制之一。 3、與Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞亞群變化一致，體外循環(huán)手術(shù)中T淋巴細胞內(nèi)Th1、Tc1特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子T-bet及上游轉(zhuǎn)錄因子STAT1表達下調(diào)；Th2、Tc2特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子GATA3及上游轉(zhuǎn)錄因子STAT6表達上調(diào)。T-bet/GATA3可能是Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞亞群極性分化的內(nèi)在決定性因素，有望成為調(diào)節(jié)Th1、Tc1/Th2、Tc2細胞亞群平衡，進而調(diào)節(jié)機體抗炎/