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文檔簡介
1、目的:研究不同年齡段腹腔感染大鼠在脾切除前后不同時間點Th1(TNF-α)和Th2(IL-10)細胞因子的表達。
方法:健康雌性SD大白鼠120只,按年齡分為A組:幼年組(1月齡)和B組:成年組(12月齡),體重分別約為150g和400g,每組60只,每組又分為脾切組和保脾組,脾切除后飼養(yǎng)2周,再隨機從每小組抽取6只,其余大鼠采用盲腸結(jié)扎加穿刺法(CLP)復(fù)制腹腔感染模型,分別于CLP后3h、6h、12h、24h不同時間點
2、抽取血液,并用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白介素10(IL-10)在血清中的含量,取心、肝、肺、腎、腸作病理形態(tài)學(xué)檢查,用免疫組化技術(shù)檢測CLP前后肝臟組織中TNF-α、IL-10的表達水平的變化。
結(jié)果:1、CLP后,脾切組24小時內(nèi)大鼠的死亡率3.33%,而有脾組無死亡,死亡率0%。2、各組大鼠在CLP后有不同程度腹腔感染,同時心、肺、肝、腎、腸組織也有不同程度的病理改變,其中幼年脾切
3、大鼠最顯著。3、各組TNF-α在CLP后3小時都達到高峰,隨后緩慢下降,各時間點TNF-α水平都高于CLP前,統(tǒng)計有顯著差異(P<0.01)。A組與B組TNF-α水平變化趨勢基本一致,比較各時間的TNF-α水平無明顯差異(P>0.05),但總體水平可以看出各個時間點A組TNF-α濃度都大于B組。脾切組在CLP后3小時TNF-α水平高于有脾組(P<0.05),6小時兩組無差異(P>0.05),但12小時后,脾切組TNF-α水平低于有脾組持
4、續(xù)至24小時,有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。4、各組IL-10水平在CLP后3,6,12小時較CLP前增高(P<0.01),有脾組在24小時時恢復(fù)到CLP前,A組與B組在各時間點比較無明顯差異(P>0.05)。脾切組在CLP后3小時IL-10水平與有脾組比較無明顯差異(P>0.05),6小時后,脾切組IL-10的水平高于有脾組持續(xù)至24小時,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01~0.05)。5、各組肝組織中TNF-α的表達水平較CLP前明顯升
5、高(P<0.01),3小時達高峰,而后逐漸降低。A組與B組各時間點肝組織TNF-α的表達水平差別不顯著。CLP后3小時,脾切組TNF-α的表達水平較有脾組升高(P<0.05),6小時無差異,但12小時后出現(xiàn)脾切組TNF-α的表達水平明顯低于有脾組(P<0.05),24小時后更加明顯(P<0.01)。6、各組肝臟組織中IL-10的表達水平在CLP后明顯升高,在3小時達到高峰,并逐漸降低,24小時仍高于CLP前(P<0.01),A組與B組I
6、L-10表達水平相比無統(tǒng)計學(xué)意義,脾切組與有脾組在CLP后3小時IL-10表達無差異(P>0.05),6小時脾切組IL-10表達水平高于有脾組,CLP24小時后,脾切組IL-10的表達仍高于有脾組(P<0.01~0.05)。
結(jié)論:
1.不同年齡段腹腔感染大鼠脾切除前后TNF-α、IL-10的變化水平基本一致。
2.脾切除導(dǎo)致腹腔感染晚期大鼠體內(nèi)TNF-α降低及IL-10的升高,使其更易發(fā)生免疫
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