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文檔簡介
1、目的:角膜的無血管化是角膜的主要特征。在感染、外傷及其他原因誘導(dǎo)下,可發(fā)生角膜新生血管(Comealneovascularization,CNV),引起視力嚴重損害。 新生血管形成機制復(fù)雜,許多生長因子和調(diào)節(jié)因子參與這一過程,并在血管生成和抑制之間形成動態(tài)的平衡。本實驗通過大鼠堿燒傷誘導(dǎo)的角膜新生血管模型,觀察血管內(nèi)皮生長因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、色素上皮衍生因子(Pigm
2、entepitheliumderivnfactor,PEDF)和基質(zhì)金屬蛋白酶一2(Matrimetalloprdeinase-2,MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-2(TissueinhibitorofmetaUoproteinase-2,TIMP-2)在血管形成過程中的表達及動態(tài)變化,探討作用機理,為臨床治療提供實驗研究依據(jù)。 在我國,眼外傷(尤其是嚴重的眼化學傷)引起的角膜CNV是十分常見的眼病,約占眼表疾病的10%,
3、因此積極探索治療有效、副作用小的治療方法是有重要意義的。本實驗采用生長抑素類似物奧曲肽(Octreotide,Oct)治療大鼠角膜堿燒傷,觀察其在角膜新生血管形成中的作用,并探討藥物作用機制,為臨床上治療角膜堿燒傷提供新的思路。 方法:實驗用Wistar大鼠42只隨機分為奧曲肽治療1、2、3組和對照組,余2只為正常對照,四個實驗組大鼠雙眼均制成角膜中度堿燒傷模型。1、2、3治療組術(shù)后分別用0.001%、0.005%、0.01%奧
4、曲肽眼液滴眼,對照組以復(fù)方氯化鈉注射液滴眼,均為每日4次,每次1滴,連用7天。 堿燒傷術(shù)后在裂隙燈顯微鏡下觀察大鼠角膜混濁度;組織病理切片HE染色作微血管計數(shù)及多形核白細胞(PMN)計數(shù);透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)的改變;免疫組化檢測角膜VEGF、PEDF和MMP-2、TIMP-2的表達情況;測量每只大鼠體重。 結(jié)果:奧曲肽治療組在3、7、14、30天較對照組角膜混濁程度輕(P<0.05);第14天形成的新生血管數(shù)量較對照組少
5、(P<0.05);第1、3、7、14天角膜組織PMN細胞數(shù)較對照組少(P<0.05)。 VEGF、PEDF及MMP-2、TIMP-2在正常角膜組織的上皮細胞均有少量表達。堿燒傷術(shù)后,角膜VEGF的表達在3天時達到高峰,此后逐漸下降;MMP-2在7天時表達到頂點;PEDF和TIMP-2表達情況基本一致,7、14天表達逐漸增強,此后有所減弱。 奧曲肽治療組在3、7天時VEGF、MMP-2的表達低于對照組,3、7、14天PED
6、F及14天TIMP-2的表達高于對照組,有顯著性差異(P<0.05)。0.005%及0.01%奧曲肽治療組和對照組比較比0.001%組有顯著性差異的時程長。 結(jié)論:VEGF、PEDF及MMP-2、TIMP-2均參與了角膜堿燒傷后新生血管增殖的調(diào)控,并在這一過程中發(fā)揮著重要的作用。奧曲肽通過抑制促血管生成因子VEGF、MMP-2的表達和增強抑制血管生成因子PEDF、TIMP-2的表達,及減輕白細胞浸潤等途徑達到抑制角膜堿燒傷后新生
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