鼓槌石斛腸粘膜免疫活性多糖的篩選及其理化性質(zhì)和結構組成的研究.pdf

1、本文以鼓槌石斛為材料，從腸道粘膜免疫活性出發(fā)研究鼓槌石斛的各個組分，通過將鼓槌石斛多糖的提取、分離、純化和免疫活性篩選相結合，獲得了均一的多糖組分(DCP-F4)，優(yōu)化了鼓槌石斛多糖的提取分離方法，對鼓槌石斛各組分進行了理化性質(zhì)的測定，并對均一的高活性多糖的初級結構的進行分析，為鼓槌石斛多糖的構效關系的研究奠定了基礎。實驗結果如下:
　　(1)均一活性多糖的獲得:將鼓槌石斛干粉按照酒精醇提、熱水浸提、醇沉、脫蛋白、透析的步驟依次提

2、取、分離，對得到的提取物DCE-A(7.48％)，DCE-B(7.93％)，DCE-C(7.14％)，DCE-D(4.67％)，DCP(3.72％)進行腸免疫活性初步篩選。接著對DCP進行酒精分級醇沉、陰離子交換柱分離、葡聚糖凝膠柱分離結合活性篩選得到高活性組分DCP-F4。
　　(2)鼓槌石斛多糖的腸道免疫活性:鼓槌石斛多糖的各提取物都具有很好體外腸道免疫活性，粗提取物作用組的骨髓細胞增殖率提高了3.3％-89.0％，通過逐級的

3、分離，鼓槌石斛多糖含量越來越高，且腸道免疫活性也越來越高。粗多糖用60％的乙醇沉淀下來的多糖組分(DCP-2)的腸免疫活性較其他兩個組分更好，在實驗濃度范圍內(nèi)，骨髓細胞的增殖率在44.8％-91.4％。DCP-2進一步分離得到的各組分中以水洗糖的促進作用最強，骨髓細胞的增值率為56.1％-95.7％。水洗糖通過分離得到的組分中DCP-F4的活性最佳，對骨髓細胞的促進作用為對照組的2.136倍。
　　(3)鼓槌石斛均一多糖理化性質(zhì)測

4、定:DCP-F4的碳水化合物含量為94.32％，糖醛酸含量為1.85％，重均分子量為1.37×104Da，多分散系數(shù)為1.1497。DCP-F4的傅里葉紅外分析具有多糖的標志吸收峰。樣品的DSC分析表明多糖僅有一個122℃吸收熱和316℃放熱峰。多糖的單糖組成是由Xyl、Man、Glc構成的，比例為依次為1∶7∶16;單糖組成分析結合核磁分析，它們的一級結構大致是以1，4-Linked Manp和1，4-Linked Glcp為主鏈，支