桑黃胞內(nèi)多糖的分離純化、活性及理化性質(zhì)研究.pdf

1、本研究以桑黃菌絲體作為研究材料，對(duì)桑黃的主要活性成分--多糖進(jìn)行提取純化研究，并對(duì)不同多糖組分進(jìn)行活性及理化性質(zhì)研究，旨在為桑黃的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　 以多糖得率為考察指標(biāo)，采用單因素和正交試驗(yàn)對(duì)熱水、超聲波、超聲波復(fù)合酶三種提取方法中影響菌絲體多糖提取得率的主要因素進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明，熱水浸提法的最佳工藝條件為處理時(shí)間3.5h，料液比1:50，溫度90℃，多糖的提取率為2.47％；超聲波法的最佳工藝條件為超聲

2、處理時(shí)間20min，料液比1:25，功率500W，多糖提取率為3.356％；超聲波復(fù)合酶法的最佳工藝條件為pH6.5，酶解溫度50℃，纖維素酶2.5％、果膠酶2.5％、蛋白酶1％(％對(duì)底物)，酶解時(shí)間120min，多糖提取率為6.619％。
　　 采用了三氯醋酸(TCA)法，對(duì)TCA含量以及去除次數(shù)對(duì)去蛋白效果進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明，當(dāng)TCA含量為7.5％，去除次數(shù)為3次，得到較好的去除效果，此時(shí)蛋白質(zhì)的去除率為83.28％，多

3、糖的損失率為11.91％。
　　 采用DEAE-52陰離子交換柱和葡聚糖凝膠SephadexG-100柱層析純化后，陰離子柱階段洗脫得到PBI、PBⅡ兩個(gè)組分，葡聚糖凝膠SephadexG-100柱層析分別得到了PBI-1、PBⅡ-1兩個(gè)組分，經(jīng)過(guò)HPLC鑒定為單一對(duì)稱峰，為均一性多糖。
　　 分別對(duì)桑黃粗多糖和純化組分免疫活性進(jìn)行研究，研究結(jié)果表明，桑黃粗多糖、PBⅡ-1顯著提高小鼠單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能，均能提高

4、小鼠的廓清指數(shù)和吞噬指數(shù)，且一定程度上提高免疫低下組小鼠的免疫能力，PBI-1有一定效果但不顯著。桑黃粗多糖，PBⅡ-1均能顯著促進(jìn)小鼠的溶血素生成，且一定程度上促進(jìn)免疫低下組小鼠溶血素生成，PBI-1有一定效果但不顯著。
　　 理化性質(zhì)研究表明，PBI-1分子量約為47400，而PBⅡ-1分子量約為8710。兩個(gè)組分都有糖類特征吸收峰，869cm-1附近的吸收峰說(shuō)明多糖為β-吡喃糖苷鍵。PBI-1、PB11-1都由鼠李糖、阿拉