桑黃多糖分離純化及其藥理作用研究.pdf

1、桑黃（Phellinus baumii）是一種具有多種藥理作用的真菌子實體，因寄生于桑樹而得名?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)桑黃多糖具有抗腫瘤、抗炎癥、抗氧化、降血糖、免疫調(diào)節(jié)、護肝等多種藥理作用。本論文主要以桑黃子實體粗多糖以及分離純化得到的純多糖為研究對象，研究其抗癌和免疫調(diào)節(jié)作用機制，為桑黃多糖綜合開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。研究內(nèi)容如下:
　　1)采用超聲波輔助熱水浸提法提取桑黃粗多糖，優(yōu)化了料液比、提取溫度和提取時間這三個工藝條件。當料液比

2、為1∶26，提取溫度為100℃，提取時間為4.35 h時，桑黃多糖的平均提取得率為1.645％，其與理論預(yù)測值相比的相對誤差為3.58％，說明試驗建立的桑黃多糖提取得率回歸預(yù)測模型具有較好的擬合性。研究結(jié)果為桑黃的深度開發(fā)利用提供了依據(jù)。
　　2)將用超聲波輔助熱水浸提法提取到的桑黃粗多糖，用DEAE離子交換柱和Sephacryl S400/S200凝膠柱進行純化，再用紅外光譜掃描儀進行定性檢測。結(jié)果得到了較為均一的桑黃多糖(PB

3、PP)，這為后續(xù)研究桑黃多糖的藥理作用奠定了基礎(chǔ)。
　　3)通過抗DPPH、抗羥自由基和還原能力試驗，研究桑黃多糖的抗氧化能力。與陰性對照組相比，試驗組在統(tǒng)計學(xué)上均達到顯著性水平，說明桑黃多糖具有抗氧化作用。
　　4)通過CCK-8法檢測桑黃多糖對HELA和SGC-7901兩種細胞系的增殖影響，結(jié)果表明桑黃多糖能顯著抑制HELA和SGC-7901細胞的增殖，表現(xiàn)出一定的抗癌效果。分析細胞周期圖譜后發(fā)現(xiàn)，桑黃多糖對HELA細胞

4、的抑制作用主要是通過將細胞分裂阻滯在G2期，對SGC-7901細胞的抑制作用主要是通過將細胞阻滯在S期，表明桑黃多糖通過阻礙細胞分裂以實現(xiàn)抗癌作用。
　　5)分別采用CCK-8法、中性紅試驗法、免疫細胞因子檢測法、細胞周期檢測法，研究桑黃多糖對RAW264.7細胞的增殖、吞噬能力、分泌免疫因子及分裂的影響。試驗發(fā)現(xiàn)桑黃多糖能促進RAW264.7細胞增殖，增強其吞噬能力，促進其分泌IL-6和TNF-α細胞因子，并增強細胞周期中的S期