實驗性兔肺動脈栓塞缺血再灌注肺血管內(nèi)皮損傷以及熱休克蛋白的保護(hù)作用.pdf

1、目的：大量研究表明，再灌注可以觸發(fā)一系列損傷反應(yīng)，引起相應(yīng)臟器致命性損傷。人們發(fā)現(xiàn)肺移植、體外循環(huán)手術(shù)、肺動脈血栓內(nèi)膜剝除術(shù)、肺栓塞溶栓治療等多種臨床情況下發(fā)生肺缺血后再灌注，肺損傷不但沒有減輕反而加重，臨床上將這種現(xiàn)象稱為肺缺血再灌注損傷(IRLI)。其特征性變化是肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，表現(xiàn)為肺血管通透性增加、肺血管阻力增加、肺動脈高壓等。目前，再灌注肺損傷的確切發(fā)生機制尚不十分清楚，可能與炎性介質(zhì)、氧自由基、肺泡上皮和肺血管內(nèi)皮損

2、傷等多種因素有關(guān)。熱休克蛋白(HSP)是細(xì)胞在遭受到熱或其他損傷因素(如缺血、缺氧、重金屬)作用后誘導(dǎo)生成的一組蛋白質(zhì)。在維持組織細(xì)胞的自身穩(wěn)定和環(huán)境適應(yīng)性及抵御外界損傷等方面具有保護(hù)作用。研究發(fā)現(xiàn)，熱休克蛋白對心肌、肝臟、腦的缺血再灌注損傷有一定的保護(hù)作用，但對肺的缺血再灌注損傷的保護(hù)作用尚有待于進(jìn)一步研究。本文旨在探討兔肺動脈栓塞缺血再灌注模型中血管內(nèi)皮損傷時釋放的因子內(nèi)皮素-1(ET-1)，一氧化氮(NO)，血管假血友病因子(vW

3、F)的變化和熱休克蛋白(HSP)的表達(dá)研究肺損傷的可能機制及熱休克蛋白的保護(hù)作用。 方法：選取健康新西蘭白兔30只，體重2.5～3.5kg，雌雄不拘。將Berman球囊漂浮導(dǎo)管的球囊置于左下肺動脈開口處，充盈球囊，堵塞左下肺動脈，建立肺動脈栓塞模型。然后球囊放氣，復(fù)制肺動脈栓塞缺血再灌注模型。隨機分為5組：(1)假手術(shù)組(n=6)，(2)肺動脈栓塞1h組(n=6)，(3)肺動脈栓塞2h組(n=6)，(4)肺動脈栓塞2h再灌注1h

4、組(n=6)，(5)肺動脈栓塞2h再灌注2h組(n=6)。各組動物分別于栓塞前、栓塞1h、栓塞2h、栓塞2h再灌注1h、栓塞2h再灌注2h抽取靜脈血，抗凝、離心、取上清液，分裝后放入-20℃保存，分別采用放射免疫法測定血漿內(nèi)皮素(ET)的含量，酶聯(lián)免疫法測定血管性假血友病因子(vWF)的含量，硝酸還原酶顯色法測定一氧化氮(NO)的含量。實驗動物分別在相應(yīng)時間點處死，取少量左肺組織分別用4％多聚甲醛、4％戊二醛固定，采用免疫組織化學(xué)方法測

5、定熱休克蛋白(HSP70)的表達(dá)及進(jìn)行組織病理分析觀察組織超微結(jié)構(gòu)變化。采用SPSS 11.5版統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。 結(jié)論： (1)本實驗通過介入方法使用Berman球囊漂浮導(dǎo)管成功制作肺缺血再灌注動物模型，具有可控性強、重復(fù)性好的優(yōu)點，是基礎(chǔ)研究的理想動物模型。 (2)肺電鏡超微結(jié)構(gòu)變化提示肺缺血再灌注過程中存在血管內(nèi)皮損傷。 (3)ET-1、NO、vWF 均可作為內(nèi)皮細(xì)胞損傷的標(biāo)志，本文結(jié)果顯示內(nèi)皮細(xì)