大腸桿菌LTKA63及LTB和霍亂弧菌CTB基因的克隆、表達和鑒定.pdf

1、基因工程疫苗多以單一蛋白作為抗原,其免疫效果常不盡人意,通常需要使用佐劑來提高此類疫苗的免疫效果.霍亂腸毒素B亞單位(CTB)一直是效果較為公認的粘膜免疫佐劑,但近年文獻報道重組CTB與抗原混合后誘導(dǎo)S-IgA產(chǎn)生的能力弱或無,但誘導(dǎo)血清IgG作用較強.CTB的佐劑活性主要依賴其與細胞表面神經(jīng)節(jié)苷酯(GM<,1>)結(jié)合的活性.由于CTB主要通過激活Th2途徑發(fā)揮其佐劑活性,但Th2途徑可產(chǎn)生IL-4,IL-4能選擇性地促進IgE合成,因

2、而認為CTB可引起變態(tài)反應(yīng).大腸桿菌不耐熱腸毒素(LT)是近年報道較多的粘膜免疫佐劑,因其腸毒性而在實際應(yīng)用中受到限制.LT分子結(jié)果與CT類似,一個A亞單位和五個相同的B亞單位組成.A亞單位具有ADP-核糖轉(zhuǎn)移酶活性,是毒素的毒性部位.B亞單位能與哺乳動物細胞表面神經(jīng)節(jié)苷脂GM<,1>結(jié)合,介導(dǎo)A亞單位進入靶細胞.不少研究結(jié)果證實,將LT第63位絲氨酸突變?yōu)橘嚢彼岬耐蛔凅w(LTK63)的毒性幾乎完全全消失,但其免疫佐劑活性不變.很多文獻

3、報道,單一使用LTKA63或LTB也具有粘膜免疫佐劑活性.LTB的佐劑作用也依賴其與細胞表面神經(jīng)節(jié)苷酯(GM<,1>)結(jié)合的活性,LTKA63的作用機制尚不清楚,但大部分研究者認為與其ADP-核糖轉(zhuǎn)移酶活性無關(guān).LT主要激活Th1途徑,其次是Th2途徑,幫認為LT一般不引起變態(tài)反應(yīng).令人感興超的是,LTKA63和LTB佐劑活性的作用機制不同,兩者合用可能有協(xié)同效應(yīng).綜上所述,LTK63、LTKA63或LTB較之CTB更適合作為口服基因工