中藥鬼燈檠根莖不同提取物及GC-MS分析研究.pdf

1、鬼燈檠(Rodgersia aesculifolia Batal．)又名七葉鬼燈檠，系虎耳草科(Saxifraceae)鬼燈檠屬植物，具有清熱解毒、止血、止瀉等功用，民間作為草藥應(yīng)用，涉及治療范圍較寬<'[1]>。本試驗分別采用索氏提取法、超聲提取法、超聲協(xié)同水蒸氣蒸餾法、超臨界CO<,2>提取法和微波輔助提取法，提取鬼燈檠根莖揮發(fā)性成分，進(jìn)行GC—MS分析，并對幾種提取方法進(jìn)行比較。 本論文包括綜述和研究報告兩部分內(nèi)容。

2、 第一部分：綜述鬼燈檠(Rodgersia aesculifolia Batal．)又名七葉鬼燈檠，系虎耳草科(Saxifraceae)鬼燈檠屬植物，民間作為草藥應(yīng)用，涉及治療范圍較寬[<'1，2]>?，F(xiàn)代藥理學(xué)試驗研究證明鬼燈檠具有：(1)活血調(diào)經(jīng)，去風(fēng)濕作用；(2)清熱解毒、止血、止瀉等功用；(3)抗病毒作用，直接抑制或間接抑制DNA病毒和。RNA等病毒；(4)抗菌作用，對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、福氏痢疾桿菌均有抑制作

3、用，對肺炎克雷伯、胸膜肺炎桿菌、小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌和辣椒疫霉病菌菌絲的生長等有一定抑制作用；(5)免疫增強(qiáng)作用。另外，臨床研究表明，鬼燈檠制劑對痢疾、腹瀉、慢性支氣管炎、慢性胃炎，甲狀腺疾病和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有很好的療效。 中藥作用的基礎(chǔ)是其化學(xué)物質(zhì)組成。利用現(xiàn)代科技，闡明中藥化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)，色譜聯(lián)用技術(shù)集成了色譜和結(jié)構(gòu)鑒定的光譜手段之優(yōu)點，是當(dāng)前最為引人注目的一種新型分析手段，對于中藥這樣復(fù)雜混合物的分析具有十分重要的意義。

4、在色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)中，其中氣相色譜一質(zhì)譜(gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS)聯(lián)用技術(shù)最為成功、成熟因而成為復(fù)雜未知混合物分析的有效手段。本論文將在第一部分做一簡單概述。 天然有機(jī)化合物的提取方法很多，按形成的先后可分為經(jīng)典提取方法和現(xiàn)代提取方法。經(jīng)典提取方法由于提取時間長，或效率低，或溶劑用量大，或操作繁瑣，或不利于熱不穩(wěn)定成分的提取等局限性，迫切須要新的提取分離技術(shù)滿足中藥

5、現(xiàn)代化的發(fā)展?，F(xiàn)代提取方法是以現(xiàn)代先進(jìn)的儀器為基礎(chǔ)或新發(fā)展起來的提取方法，近年來在某些方面已經(jīng)代替了傳統(tǒng)的提取方法。本章將對本實驗所涉及的各種提取方法原理、提取裝置和提取過程以及在中草藥和天然產(chǎn)物有效成分提取應(yīng)用作以概述。 第二部分：研究報告分為五個部分：鬼燈檠根莖乙醚索氏提取及GC-MS定性分析；鬼燈檠根莖乙醚超聲提取及GC-MS分析：超聲協(xié)同水蒸氣蒸餾提取及GC-MS分析；超臨界CO<,2>提取及GC-MS分析；鬼燈檠微波輔

6、助提取及GC-MS分析，主要內(nèi)容為： 1.通過選取色譜柱、進(jìn)樣口溫度、分流比、程序升溫的設(shè)計建立最佳測定鬼燈檠根莖揮發(fā)性成分的GC-MS條件，具體條件為：選擇弱極性的Rtx -5MS5％dipheny-95％dimethylpolysiloxane(0.25 mm×30.0 m，0.25μm)彈性石英毛細(xì)管柱色譜柱分析鬼燈檠提取物成分，程序升溫如下，最后在280℃保持4 min；進(jìn)樣口溫度為250℃，選擇分流比為1：40。按照此

7、條件對鬼燈檠根莖乙醚索氏提取物進(jìn)行分離和分析。提取得到0.2948 g黃色油狀液體，產(chǎn)率為2.95％，共鑒定出46個化合物，以面積歸一化測定其相對含量，其中成分有棕櫚酸(15.27％)、油酸(14.90％)、亞油酸(9，12-(Z，Z)-十八碳二烯酸)(15.35％)、硬脂肪酸(4.36％)、4-烯-3-豆甾酮(4.33％)和二十八烷烴(3.38％)等。 2.按照一定的料液比和提取時間，在一定的樣品量、料液比和提取時間條件下，對

8、干燥的鬼燈檠根莖分別進(jìn)行超聲提取、超聲協(xié)同水蒸氣蒸餾提取、超臨界C02提取和微波輔助提取。各種提取方法所得的提取物經(jīng)過一定樣品前處理后，分別得到0.2108 g，0.1796 g，1.5386 g，0.9530 g油狀提取物液體，其中各種提取方法各自產(chǎn)率為8.78％，1.07％，15.39％，6.35％。 3.按照上述已建立好的GC-MS分析條件，對鬼燈檠根莖不同方法的提取物進(jìn)行分離和分析，得到不同提取物各自總離子流色譜圖(TI

9、C)，各色譜峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖經(jīng)人工解析及NIST27和NIST147譜庫檢索，按各色譜峰的質(zhì)譜碎片圖與文獻(xiàn)核對，查對有關(guān)質(zhì)譜資料，對基峰、質(zhì)荷比和相對豐度等方面進(jìn)行直觀比較，確定其化學(xué)成分，索氏提取物、超聲提取物、超聲協(xié)同水蒸氣蒸餾提取物、超臨界CO<,2>提取物和微波輔助提取物，各自鑒定出46，48，44，45和40種化合物，并用面積歸一化法，測定出其相對含量。不同提取方法的提取物主要化合物類別基本一致，都為脂肪酸和烷烴類化合物。其中在