廣地龍配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化研究及地龍凝膠劑的研制.pdf

1、1. 目的 為了更好地控制廣地龍配方顆粒的質(zhì)量，保證臨床療效，本研究在中醫(yī)藥理論和《中藥配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求》指導(dǎo)下，對廣地龍飲片入選標(biāo)準(zhǔn)、廣地龍配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行系統(tǒng)研究，對指標(biāo)成分次黃嘌呤和琥珀酸進行藥效學(xué)驗證。同時研制地龍凝膠劑并進行初步的藥效學(xué)評價。 2. 方法 研究內(nèi)容主要包括：廣地龍飲片的入選標(biāo)準(zhǔn)，廣地龍配方顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性研究，指標(biāo)成分次黃嘌呤和琥珀酸止咳平喘的藥效學(xué)驗證，地龍

2、凝膠劑的制備及治療燙傷的藥效學(xué)初探等。 廣地龍飲片入選標(biāo)準(zhǔn)研究中，采用薄層色譜法鑒別氨基酸、琥珀酸及氯仿提取物，建立高效液相色譜法及高效毛細管電泳法分別測定次黃嘌呤和琥珀酸含量的方法。高效液相法測定次黃嘌呤含量的色譜條件：色譜柱為ODS-EP 5μm ,4.6 mm×150 mm，流動相為水-甲醇-四氫呋喃（100﹕0.5﹕0.5），流速為1.0 ml/ min ，檢測波長λ=254nm，柱溫為室溫，理論板數(shù)按次黃嘌呤峰計算不低

3、于3888。高效毛細管電泳測定琥珀酸含量的條件：以未涂層融硅毛細管（50 cm×75μm）為分離柱，1mmol/L Tris-10mmol/L H3BO3-0.5％ 四乙烯五胺-0.025 mmol/L CTAB （pH=11.45)體系為電泳介質(zhì)，分離電壓為-10KV。還對廣地龍飲片進行雜質(zhì)、水分及浸出物等項目的檢查。 配方顆粒采用傳統(tǒng)湯劑的制備方法，并通過離心除雜、噴霧干燥及制粒獲得。以次黃嘌呤的含量為指標(biāo)，用正交設(shè)計法優(yōu)

4、選有效成分的最佳提取工藝。 配方顆粒的薄層鑒別和含量測定與飲片類似，并按照2005 版中國藥典一部規(guī)定的顆粒劑項下對廣地龍配方顆粒裝量差異、溶化性和含水量進行檢查。 初步穩(wěn)定性實驗采用實驗室留樣觀察三個月。指標(biāo)成分的藥效學(xué)驗證分別以組胺和乙酰膽堿混合溶液引喘法及霧化氨水引咳法來評價次黃嘌呤和琥珀酸的止咳平喘作用。 地龍凝膠劑的制備選用卡波姆為凝膠基質(zhì)，并含有甘油和丙二醇等附加成分。藥效學(xué)實驗則分別以燙傷后面積，

5、含水量，羥脯氨酸含量變化以及肉眼觀察和病理切片來評價。 3. 結(jié)果 廣地龍飲片入選標(biāo)準(zhǔn)研究中改進了2005 版中國藥典一部地龍項下氨基酸薄層鑒別方法，增加丙氨酸的斑點，并增加了琥珀酸的斑點鑒別；HPLC 測得不同產(chǎn)地的廣地龍次黃嘌呤含量為0.54～1.25 mg/g；HPEC 測得藥材中琥珀酸(產(chǎn)地：廣西)含量為0.8mg/g。 廣地龍配方顆粒制備研究中，確定最佳提取工藝條件為：取廣地龍30g，剪碎，加入12

6、 倍量的水，浸泡1 小時，煎煮3 次，過濾，合并煎煮液，濃縮。 廣地龍配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中，配方顆粒的次黃嘌呤含量測定方法色譜條件與飲片一致，不同批號的配方顆粒次黃嘌呤含量為1.5～3.3mg/袋。穩(wěn)定性實驗:實驗室留樣觀察三個月，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項目檢查，包括外觀、鑒別、檢查、含量測定、衛(wèi)生學(xué)，均符合規(guī)定。 小鼠的哮喘和咳嗽實驗證明次黃嘌呤、琥珀酸有止咳平喘療效。選擇這兩個成分作為指標(biāo)成分是合理的。 地龍凝膠劑治

7、療燙傷實驗中受傷面積數(shù)據(jù)表明廣地龍無糖凝膠和廣地龍含糖凝膠對燙傷有治療作用。含水量實驗數(shù)據(jù)表明廣地龍無糖凝膠和廣地龍含糖凝膠可減少水腫。羥脯氨酸含量測定數(shù)據(jù)表明廣地龍含糖凝膠使?fàn)C傷部位恢復(fù)較快。 4. 結(jié)論 本研究建立的廣地龍飲片和配方顆粒質(zhì)量控制方法規(guī)范，科學(xué)，通過藥效學(xué)的驗證，說明以次黃嘌呤和琥珀酸含量作為控制廣地龍飲片及配方顆粒質(zhì)量的合理性，為廣地龍及其產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。另外本課題對廣地龍促進傷口的愈合