不同程度高脂血癥患者血漿ONOO-、脂聯(lián)素、TNF-α的變化及其臨床意義.pdf

1、研究背景：
　　高脂血癥是體內(nèi)脂類代謝紊亂導(dǎo)致血脂水平增高的一種病理生理狀態(tài)，可導(dǎo)致動脈粥樣硬化的形成，從而引起多種心腦血管疾病。高脂血癥特別是高膽固醇血癥引起的血管內(nèi)皮功能障礙，是動脈粥樣硬化導(dǎo)致各種心腦血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的始動環(huán)節(jié)，而血管內(nèi)皮功能障礙的重要機(jī)制之一為氧化應(yīng)激，過多的一氧化氮（NO）可與超氧化物結(jié)合形成過氧亞硝基陰離子（ONOO-），ONOO-具有極強(qiáng)的細(xì)胞毒性，其化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定且氧化力強(qiáng)，通過對蛋白的氧化/硝基

2、化作用，引起血管內(nèi)皮的氧化應(yīng)激和組織損傷，從而加重內(nèi)皮損傷。
　　脂聯(lián)素（APN）是近年發(fā)現(xiàn)的一種由脂肪細(xì)胞特異分泌的細(xì)胞因子，是一種內(nèi)源性的血管保護(hù)因子。血循環(huán)中的脂聯(lián)素主要以三聚體（即低分子量，LMW），六聚體（即中分子量，MMW）及高聚體（即高分子量，HMW）的形式存在，其血漿含量還可因機(jī)體代謝情況和疾病狀態(tài)而改變，具有改善胰島素敏感性、抗炎、抗動脈粥樣硬化等多種生理功能。腫瘤壞死因子α（TNF-α）是脂肪細(xì)胞分泌的另一種細(xì)

3、胞因子，可通過促進(jìn)粘附分子的表達(dá)，炎癥細(xì)胞的募集和激活，并可通過影響脂質(zhì)代謝而促進(jìn)動脈斑塊形成的作用。
　　前期動物研究發(fā)現(xiàn)，高膽固醇血癥大鼠血漿中炎癥因子TNF-α水平、內(nèi)皮損傷相關(guān)因子ONOO-以及內(nèi)源性脂聯(lián)素水平均顯著升高，而給予外源性脂聯(lián)素進(jìn)一步增加其水平可有效減少TNF-α和ONOO-的生成。研究證明，在脂聯(lián)素多聚體的三種形式中，HMW具有較為明確的保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的作用。那么，在人類情況如何呢？是否在人類動脈粥樣硬化性疾病

4、中也發(fā)揮作用呢？特別是在單純高膽固醇血癥患者與合并冠心病的患者中，ONOO-、脂聯(lián)素及其多聚體與TNF-α的水平如何變化，其相互關(guān)系如何，目前仍缺乏相關(guān)的研究報(bào)道。
　　為此，本研究擬通過觀察不同程度、及是否合并冠心病的高膽固醇血癥患者進(jìn)行血漿中ONOO-、APN與TNF-α水平檢測，以其探討高膽固醇對血管內(nèi)皮的損傷及脂聯(lián)素對其調(diào)節(jié)作用，為進(jìn)一步明確高膽固醇血癥對動脈粥樣硬化性心血管疾病的防治提供新的依據(jù)。
　　研究目的：<

5、br>　　觀察健康人、單純高膽固醇血癥患者和合并冠心病患者不同組中血漿ONOO-、APN與TNF-α的水平；探討不同組別中ONOO-、APN和TNF-α的變化、其與冠心病發(fā)生的相關(guān)性及可能的機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　收集2010年1月至2010年12月期間于第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院老年病科就診，年齡在40到60歲之間的男性患者。實(shí)驗(yàn)分為3組，分別為：單純低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）邊緣升高組（50例），高膽固醇血癥合并

6、冠心病組（50例），和健康對照組（40例）。以上各組之間年齡、體重指數(shù)均進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。取清晨空腹靜脈血，分離血清，用ELISA試劑盒行脂聯(lián)素、TNF-α、過氧亞硝酸根陰離子（ONOO-）的標(biāo)記物硝基酪氨酸（NT）的平行測定。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.LDL-C邊緣升高組（HL）、高膽固醇血癥合并冠心病組（HCHD）與正常對照組（CON）的年齡、體重指數(shù)、血壓、血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白及糖化

7、血紅蛋白等代謝性指標(biāo)均無顯著性差異（P>0.05）。LDL-C水平在HL組和HCHD組顯著高于CON組（P<0.05），血漿總膽固醇的水平在HL組較CON組無顯著差異（P>0.05），HCHD組則顯著高于CON組（P<0.01）。
　　2.血漿NT水平在HL組顯著高于CON組（24.78±2.21vs12.51±3.58,P<0.05)，在HCHD組則顯著高于HL組（50.63±5.62vs24.78±2.21,P<0.01）；T

8、NF-α水平在HL組明顯低于對照組（50.37±16.31vs101.8±15.66,P<0.05），在HCHD組則明顯高于對照組（185.42±16.73vs101.8±15.66,P<0.01）。
　　3.血漿總脂聯(lián)素水平在HL組與正常對照組相比顯著升高（8.83±0.51vs6.02±0.46,P<0.01），在HCHD組則顯著降低（3.71±0.44vs6.02±0.46,P<0.01）。脂聯(lián)素三種存在形式的進(jìn)一步檢測結(jié)果

9、顯示：HMW與MMW水平在HL組均顯著升高（P均<0.01），幾乎為對照組的兩倍，HCHD組則又下降至幾乎正常組水平；而LMW在HL組和HCHD組均顯著降低（P均<0.01）。
　　4.HL組的患者，血漿LDL-C水平與總脂聯(lián)素水平（r=0.793，P<0.01）、HMW（r=0.815，P<0.01）及MMW（r=0.668，P<0.01）均呈正相關(guān)，但與LMW呈負(fù)相關(guān)（r=-0.391，P<0.05），血漿LDL-C水平還與血

10、漿NT水平呈正相關(guān)（r=0.909，P<0.05）。血漿總脂聯(lián)素水平（r=-0.539，P<0.01）、HMW（r=-0.674，P<0.01）、MMW（r=-0.526，P<0.01）均與TNF-α呈負(fù)相關(guān)，但LMW與TNF-α呈正相關(guān)（r=0.397，P<0.05）。
　　5.HCHD組患者的血漿LDL-C水平與總脂聯(lián)素水平、HMW、MMW、LMW及NT均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性（P>0.05），總脂聯(lián)素水平、HMW、MMW、LMW與T

11、NF-α也均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性（P>0.05），相關(guān)系數(shù)r均較小。
　　結(jié)論：
　　1.首次發(fā)現(xiàn)在血脂異常程度較輕的LDL-C邊緣升高患者中，血漿中的ONOO-標(biāo)記物—NT水平顯著升高，提示患者此時可能出現(xiàn)內(nèi)皮氧化/硝化應(yīng)激損傷。此過程中伴有脂聯(lián)素代償性分泌增加，同時抑制了炎性因子TNF-α的生成。
　　2.在血脂異常程度較重的高膽固醇血癥合并有冠心病患者中，血漿ONOO-標(biāo)記物—NT水平進(jìn)一步升高，伴有TNF-α水平的顯