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1、 本文探討層黏連蛋白(Ln)和纖維連接蛋白(Fn)對(duì)原代培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞(hLECs)生長(zhǎng)特性的影響;通過觀察維甲酸(RA)對(duì)傳代培養(yǎng)的hLECs特性的影響,探討維甲酸抑制晶狀體后囊混濁形成(PCO)的細(xì)胞學(xué)機(jī)制;探討層黏連蛋白對(duì)傳代培養(yǎng)的hLECs蛋白激酶B(PKB)活性的影響和激活PKB的信號(hào)分子途徑。 方法:首先選用28只人晶狀體的前囊膜,采用組織塊法接種于Ln(Ln組)、Fn(Fn組)和2﹪牛血清白蛋白(對(duì)照
2、組)包被的培養(yǎng)皿中。觀察組織塊周圍晶狀體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)間、細(xì)胞的形態(tài)及成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)間。顯示連接素43、△Np63和整合素β1的表達(dá)。然后采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)△Np63和整合素β1mRNA的水平。觀察不同濃度維甲酸對(duì)細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞增殖的影響;計(jì)算維甲酸對(duì)細(xì)胞增殖的抑制率;觀察維甲酸對(duì)整合素β1表達(dá)陽性率和波形蛋白形態(tài)的影響。最后選用3~5代人晶狀體上皮細(xì)胞,在培養(yǎng)液中加入層黏連蛋白,分別在處理后0、10、20
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