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1、廣東醫(yī)學院碩士學位論文IFNλ1對HBV相關性肝癌細胞凋亡的免疫調(diào)節(jié)效應研究姓名:馮麗光申請學位級別:碩士專業(yè):外科學(普通外科)指導教師:劉維藩20080501IFN一:LI對HBV相關性肝癌細胞凋亡的免疫調(diào)節(jié)效應研究摘要【目的】以轉(zhuǎn)染HBV全基因組并穩(wěn)定分泌HBsAg和HBeAg病毒抗原的HepG2215肝癌細胞系為細胞模型,探索IFNL1對HBV相關性肝癌細胞的免疫調(diào)節(jié)效應?!痉椒ā?采用人HepG2215肝癌細胞系傳代培養(yǎng)技術,
2、完成人HepG2215肝癌細胞的體外培養(yǎng)。2HBsAg和HBeAgELISA檢測試劑盒測定IFN九1作用0,6,12,24h后,HBV病毒顆粒的分泌表達水平。3MTT法檢測IFN九1對不同劑量新型凋亡配體TRAIL與TWEAK的生長抑制影響效應。4流式細胞術檢測IFNL1作用后HepG2215肝癌細胞周期和細胞凋亡的變化。【結果】1人HepG2215肝癌細胞體外培養(yǎng)成功,細胞狀態(tài)良好,呈貼壁性生長。2ELISA結果表明,IFN九l(濃度
3、為200ng/m1)作用后在不同時間點HepG2215細胞HBsAg和HBeAg檢測的A值均有明顯下降(PO01),其中HBeAg表達水平下調(diào)幅度更大。3Mn法結果表明,TRAIL與TWEAK(濃度為0ng/ml“一10rtg/m1)對HepG2215細胞的生長抑制具有劑量依賴性,且IFN九l與TRAIL和TWEA—K有協(xié)同效應,能增強二者抑制細胞生長的作用(P001)。4流式細胞術檢測結果顯示,各作用組細胞凋亡率明顯升高,并出現(xiàn)凋亡峰
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