聚酰胺-胺型樹(shù)枝狀高聚合物介導(dǎo)survivin反義寡核苷酸治療結(jié)直腸癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文聚酰胺-胺型樹(shù)枝狀高聚合物介導(dǎo)survivin反義寡核苷酸治療結(jié)直腸癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名：厲周申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：普通外科指導(dǎo)教師：黃宗海20090423中文摘要胰腺癌、前列腺癌和胃腸癌以及一些造血系統(tǒng)惡性腫瘤如非何杰金淋巴瘤中均有很強(qiáng)的表達(dá)。相反，在腫瘤周圍的正常組織中未見(jiàn)表達(dá)。因此，s u r v i v i n 可作為一個(gè)腫瘤細(xì)胞治療的理想靶點(diǎn)。反義寡核苷酸( a n t i s e n s eo l i

2、g o n u c l e o t i d e s ，A S O D N ) 通過(guò)序列特異性地與靶m R N A 結(jié)合而阻斷m R N A 翻譯，調(diào)節(jié)由基因到蛋白質(zhì)的信息傳遞，抑制蛋白質(zhì)的表達(dá)。A S O D N 是根據(jù)中心法則從D N A 水平入手，作用于遺傳信息的上游，所需劑量較小，因此其藥效高。由于‘A S O D N 能特異性地阻斷細(xì)胞內(nèi)單一基因的表達(dá)，而不影響其他基因的正常功能，所以特異性強(qiáng)，副作用小。由于s u r v i

3、v i n只在胚胎和惡性腫瘤組織中表達(dá)，反義s u r v i v i n 基因治療具有良好的靶向性、特異性及安全性。基因治療的重要目標(biāo)是獲得遺傳物質(zhì)在轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞中的持久整合及穩(wěn)定表達(dá)，由于A S O D N 是親水性的多聚陰離子聚合物，對(duì)生物膜的通透性差，具有不易透過(guò)細(xì)胞膜、細(xì)胞難于吸收、胞內(nèi)積累少以及易受血漿和細(xì)胞內(nèi)的核酸酶降解的特點(diǎn)，限制了它的廣泛應(yīng)用。為了增加細(xì)胞對(duì)A S O D N 的攝入率和穩(wěn)定性，而不降低轉(zhuǎn)移性，需要使用高效

4、載體傳遞A S O D N 。傳統(tǒng)的病毒和非病毒載體在轉(zhuǎn)染效率和安全性方面都存在各種不足，自納米技術(shù)產(chǎn)生以后，用納米顆粒作為基因轉(zhuǎn)移載體，已引起醫(yī)學(xué)界廣泛重視。納米微粒是一類由天然或合成的高分子物質(zhì)組成的超微固態(tài)膠狀粒子，粒徑多在1 0 ．1 0 0 n m 范圍內(nèi)，大小與病毒相仿，比一般細(xì)胞小，可將D N A 、R N A 、寡核苷酸等生物活性分子包裹在其中或由靜電相互吸引或吸附在其表面形成復(fù)合物，細(xì)胞攝取納米微粒后，通過(guò)一系列復(fù)雜的

5、過(guò)程釋放出這些活性分子，從而發(fā)揮基因的治療作用。聚酰胺一胺型樹(shù)狀大分子( p o l y a m i d o a m i n e ，P A M A M ) 是近年來(lái)國(guó)外開(kāi)發(fā)的一類新型功能高分子，其分子在結(jié)構(gòu)上具有高度的幾何對(duì)稱性、精確的分子結(jié)構(gòu)、大量的官能團(tuán)、分子內(nèi)存在空腔及分子鏈增長(zhǎng)具有可控性。多種細(xì)胞系中研究顯示，以P A M A M 為載體均較其它陽(yáng)離子載體( 如多聚賴氨酸、聚氮丙啶、脂質(zhì)體) 介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移率顯著提高。寡核苷酸／