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1、目的:探討骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syridrome,MDS)患者與再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA)患者骨髓髓系細(xì)胞的免疫表型變化及其臨床意義。 方法:采用常規(guī)骨髓穿刺術(shù),分別抽取22例MDS患者、12例AA患者、10例正常對(duì)照者的骨髓各3ml;選用多種單克隆抗體(抗體組合分別為CD10/CD34/CD45、HLA-DR/CD33/CD45、CD15/CD13/CD45、及IgG
2、1同型對(duì)照),應(yīng)用直接免疫熒光法采用流式細(xì)胞術(shù)CD45/SSC設(shè)門法,對(duì)骨髓單個(gè)核細(xì)胞各免疫標(biāo)志的表達(dá)率進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果: 1.MDS患者與正常對(duì)照組及MDS患者各亞型骨髓髓系細(xì)胞的免疫表型的比較MDS患者骨髓髓系細(xì)胞CD13、CD34、HLA-DR和CD33的表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組(P<0.05),而CD15和CD10則顯著低于正常對(duì)照組(P<0.05)。MDS患者骨髓髓系細(xì)胞的側(cè)向散射光(side scatter S
3、SC)顯著低于正常對(duì)照組。難治性貧血伴原始細(xì)胞增多(refractory araemia with excess of blasts,RAEB)組患者骨髓髓系細(xì)胞CD13和CD33的表達(dá)較難治性貧血(refractory ariemia RA)組顯著增高(P<0.05),而CD15較RA組顯著減低(P<0.05),CD34和HLA-DR的表達(dá)較RA組顯著增高(P<0.05),RAEB組髓系細(xì)胞的CD10表達(dá)均數(shù)低于RA組,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)
4、意義(P>0.05)。 2.從患者與正常對(duì)照組骨髓髓系細(xì)胞的免疫表型的比較 AA患者骨髓髓系細(xì)胞CD13、CD33、CD15、CD10、CD34和HLA-DR的表達(dá)較正常對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.MDS患者與從患者骨髓髓系細(xì)胞的免疫表型的比較MDS患者骨髓髓系細(xì)胞CD13、CD34、HLA-DR和CD33的表達(dá)顯著高于從組(P<0.05),而CD15和CD10則顯著低于AA患者(P<0.05)。RA及
5、RAEB患者骨髓髓系細(xì)胞CD13、CD33的表達(dá)均顯著高于從組(P<0.05),CD15和CD10則顯著低于從組(P<0.05),CD34和HLA-DR的表達(dá)顯著高于AA組(P<0.05)。 結(jié)論: 1.MDS患者骨髓髓系細(xì)胞的免疫表型明顯異常,且伴SSC水平明顯降低,說(shuō)明MDS患者的髓系細(xì)胞存在分化成熟障礙,提示MDS的惡性克隆源性;而實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)差大、離散大,進(jìn)一步反映了MDS的異質(zhì)性。 2.MDS患者骨髓髓
6、系細(xì)胞CD34和HLA-DR的表達(dá)較正常對(duì)照組顯著增高,說(shuō)明CD34和HLA-DR下調(diào)障礙,支持MDS患者的免疫表型錯(cuò)亂主要局限在由原粒細(xì)胞向早幼粒細(xì)胞轉(zhuǎn)化的過(guò)程中。 3.RAEB患者骨髓髓系細(xì)胞CD13、CD33、CD34和HLA-DR的表達(dá)顯著高于RA組,而CD15顯著低于RA組,提示MDS患者隨病情的進(jìn)展其髓系免疫表型異常加劇,其病態(tài)造血嚴(yán)重程度和免疫表型異常密切相關(guān)。因此,流式細(xì)胞術(shù)可用于判斷MDS患者的預(yù)后。
7、4.從患者的髓系細(xì)胞各免疫表型較正常對(duì)照組無(wú)顯著差異,說(shuō)明AA的發(fā)生可能主要是由于造血干/祖細(xì)胞數(shù)量的減少,而當(dāng)其分化為髓系祖細(xì)胞進(jìn)而發(fā)育為成熟細(xì)胞的過(guò)程中不存在障礙,即AA患者的髓系細(xì)胞可順利由原始細(xì)胞向早幼粒細(xì)胞轉(zhuǎn)化,支持從為良性造血系統(tǒng)疾病。 5.AA和MDS患者的骨髓髓系細(xì)胞免疫表型存在顯著差異,而且在RA和非重型AA亦是如此,支持二者是兩種性質(zhì)截然不同的疾病,提示流式細(xì)胞術(shù)免疫表型分析可用于兩者的鑒別診斷。 6
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