乳腺癌患者髓系來源抑制細胞的臨床觀察及相關(guān)免疫耐受機制探討.pdf

1、目的:檢測乳腺癌患者腫瘤原位組織分離的一群髓系來源抑制細胞(MDSC)中吲哚胺2，3雙加氧酶（indoleamine-2，3-dioxygenase，IDO）的表達情況，探討IDO對MDSC介導(dǎo)T淋巴細胞免疫抑制作用的影響。
　　 方法:收集30例乳腺癌患者的腫瘤組織和外周血，30例健康供者外周血，將腫瘤組織制成單細胞懸液，采用免疫磁珠技術(shù)分選腫瘤單細胞懸液中CD33+MDSC和健康供者外周血中的CD33+細胞，應(yīng)用Wester

2、n blot和PCR方法檢測MDSC中IDO的表達情況。將腫瘤組織來源MDSC和異體T淋巴細胞按照1∶1比例混合培養(yǎng)3天，在加用和不加IDO特異性抑制劑1-MT條件下，利用Annexin-V凋亡試劑盒檢測各組T淋巴細胞凋亡率，利用ELISA法檢測各組T淋巴細胞分泌的細胞因子量。
　　 結(jié)果:在正常人外周血、乳腺癌患者外周血、乳腺癌患者腫瘤單細胞懸液中MDSC所占比例分別為（4.9±4.38）％、（12.92±6.24）％、（17

3、.18±5.19）％。與正常人外周血相比，乳腺癌患者外周血和腫瘤單細胞懸液中MDSC比例顯著升高(P＜0.05)，Western blot和PCR檢測均發(fā)現(xiàn)此群MDSC中有IDO的過表達。T細胞單獨培養(yǎng)時凋亡率為（2.40±0.66）％，MDSC和T細胞共孵育組中T細胞凋亡率為（12.30±0.80）％，比T細胞單獨培養(yǎng)時顯著升高(P＜0.05)，在共孵育過程中加用1-MT組的T細胞凋亡率為(3.30±0.58)％，與不加1-MT組差異

4、具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。細胞因子檢測的結(jié)果發(fā)現(xiàn)MDSC促進T淋巴細胞TGF-β、IL-10的釋放，抑制IFN-γ的分泌，而對IL-4和IL-12的分泌影響并不明顯，而加用1-MT后MDSC和T淋巴細胞共孵育組中TGF-β、IL-10的分泌水平與未加1-MT組相比顯著降低，IFN-γ的分泌顯著增加(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:乳腺癌病人原位腫瘤組織中Iin1-CD45+CD13+CD33+CD14-CD15-的MDSC具