bcl-2、一氧化氮及肝功能在梗阻性黃疸不同時間段實驗研究.pdf

1、目的： 通過建立大鼠梗阻性黃疸模型，研究梗阻性黃疸時在不同時間段內(nèi)血清NO含量、bcl-2、肝功能以及肝臟病理變化的相互影響，并進一步探討其對梗阻性黃疸肝細胞凋亡影響的機制。 方法： Wistar大鼠，隨機將大鼠分為(1)正常對照組；(2)梗阻性黃疸組：梗阻性黃疸2、4、6、8和10天組：每組9只大鼠。用20％烏拉坦注射液麻醉后，經(jīng)上腹部正中切口將膽總管雙重結(jié)扎，術(shù)后自由進食水。 大鼠觀察指標(biāo)：

2、1、一般情況觀察：包括動物精神狀態(tài)、毛色、飲食狀況及開腹所見。 2、下腔靜脈抽血采用多道全自動生化分析儀檢測血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBil)、直接膽紅素(Dbil)、總膽汁酸(TBA)堿性磷酸酶(ALP)、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)。 3、采用硝酸還原酶法測定血清一氧化氮(NO)。 4、肝組織HE染色后光鏡下觀察肝臟的病理改變。 5、肝組織bcl-2蛋白測定，用免疫

3、組化法測定。 結(jié)果： 1、正常對照組大鼠行動敏捷，對疼痛刺激反應(yīng)靈敏、皮膚、尿液顏色無改變；腹腔無腹水，肝臟顏色鮮紅；肝細胞無腫脹、壞死，肝細胞索排列整齊，膽總管呈直徑約0.1cm。梗阻性黃疸組：各組大鼠均有不同程度的行動遲緩、對疼痛刺激反應(yīng)遲鈍，皮膚、尿液呈黃色；肝臟呈程度不等的瘀膽狀，表面無光澤，結(jié)扎處近肝側(cè)膽總管呈直徑約0.3cm-0.6cm不等的擴張；細胞呈不同程度腫脹，肝內(nèi)小膽管擴張。 2、血清中NO、

4、ALT、AST、Tbil、Dbil、TBA、ALP、GGT含量在梗阻性黃疸組各個時相均明顯高于對照組，并且隨著梗阻時間延長含量逐漸增高。 3、肝組織中bcl-2表達在梗阻性黃疸組各個時相均明顯高于對照組，主于匯管處表達。 結(jié)論： 1、bcl-2表達明顯升高，這種升高與凋亡細胞數(shù)目的變化時間上存在一致性，表明bcl-2的變化對梗阻性黃疸后肝細胞凋亡起著重要作用。 2、隨著梗阻時間的延長血清NO、ALT、AS

5、T、Tbil、Dbil、TBA、ALP、GGT值增高，表明梗阻性黃疸時肝功明顯受損，梗阻后產(chǎn)生的NO可減少肝酶的釋放，對肝細胞凋亡起著重要作用。 3、肝細胞病理改變肝細胞呈不同程度腫脹，肝內(nèi)小膽管擴張，隨梗阻性黃疸時間的延長肝細胞凋亡的增加而增加。 4、梗阻性黃疸時肝細胞凋亡和NO濃度變化在時間上存在一定關(guān)系，隨著一氧化氮濃度升高，細胞凋亡數(shù)目減少，同時bcl-2表達也升高，NO通過增加肝組織bcl-2蛋白表達而抑制梗阻