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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文VEGF體外誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞株STAT3磷酸化的研究姓名:王芬芬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)(婦科腫瘤)指導(dǎo)教師:謝幸;葉大風(fēng)2003.5.1————~塑鞭盔蘭墊塑旦黧生蘭絲堡奎在露鬟臻簿鑫靜靜筌孛熬存在毒S T A T ] 摶接續(xù)港倦,S T A T 3 耱囂露薤純鬻黎毒黲癬韻發(fā)生- 筱展有關(guān),舯瘸細(xì)箍高襲濾V E G F R s 釉商活純豹s 忡,提示S T A T s 磷酸化激浩極謝可能參與了腫瘤細(xì)胞內(nèi)v E
2、 o F 信號(hào)轉(zhuǎn)婚的過程。礦奉磷巍采是受疫瓣藏蹙學(xué)窩W e s t e r nB l o t 熬寅洼,濺霆主霾瞧霧鬢攥麴蕤贛在律井經(jīng)不掰濃度和不岡作用對(duì)閹靜V E G F 作魘下V g G F R 2 和p - S T A T 3 韻表達(dá),并采用能與V E G F R 2 特異性絀愉的短肽.阻斷V E G F 封卵巢癌細(xì)胞的拌用,以觀麟p - S T A T 3雖委參舞辯鬟整鰓爨揀¥E G F 羹蓑警鼗導(dǎo);鏊整攥襄¥蕊F 囂察纂蹇耋接豫
3、懲懿舅子機(jī)制。l 藩糕瀚鑫法 {‘以上皮性卵巢癌期胞株S K O V - 3 。C a o v - 3 .3 a o 為研究對(duì)氰,采用V E G F ( 5 0 n g /m I ,3 0 m i n ) 制激三個(gè)纓簏揀捧舞實(shí)驗(yàn)緞。囂V E G F 粼激憋三個(gè)纓皴撩作雋對(duì)照縫,檢測p - S T A T 3 豁V E G F R 2 襲選,蓊選出黎襲透V E G F R 2 積p - S T A T 3 ,并基藩¥翳F 黼激表建p -
4、S T A T 3 綴應(yīng)性高的繃胞株.作為逃一步研究的對(duì)照。采用脊刪濃度( 0 ,5 。2 5 ,5 0 ,t 0 0 n g /m t ) 霹不冠俸趟瓣霹( 0 ,1 5 ,3 0 ,4 5 t 6 0 m i n ) 鮑V E G F 測激郛巢燃潮鷹,鼴寨V E G F 靜髑囊薅辯懿疼舞箍p - S T A T 3 表達(dá)鼴躲鐫。遴一莎器矮駐≤A 鞣L 糌懿藩為V E G F R 2 的阻斷劑,譙不同濃度< 0 —4 0 ,8
5、0 ,1 6 0 - 3 2 0 uM ) 和不同作用時(shí)間( 0 ,1 5 ,3 §,4 5 ,s e 謳i n ) 嫩斷V E G F 囂V E G F R 2 鮑鰭套,褒察V £錯(cuò)誘導(dǎo)S T A T 3 磷酸健魄交蘧。鬻爝受痙蘩穩(wěn)純學(xué)窶W e s t e r n8 i 班囂方法滋囂蛋鑫檢粼。露染色強(qiáng)菠跨算法對(duì)免疫蜘胞化學(xué)結(jié)糶濺行評(píng)分和半嫩鼴分析,以強(qiáng)采用Q u a n t i t yO n e 軟件對(duì)W e s t e r
6、 nB l o t 辮揀聚避行半定爨泠攝。臻翻e w a yA N O V A 囂U o i v a r i a t eA n a l y s i so fV a r i a n c e 瓣綾謗學(xué)方法遂稽鞫裝毪努析,顯著憔水準(zhǔn)a = 0 .0 5 。所有的數(shù)糯用S P S S1 0 .0f o rw i n d o w s 軟件包進(jìn)行處理。結(jié)巢1 、細(xì)臆株篩選在S K O V 一3 ,C a o v - 3 ,3 a o 蘭令辮藤耩;鴛
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