胃癌細胞耐藥的形態(tài)學特征和相關基因的克隆及功能研究.pdf

1、目的:首先應用透射電子顯微鏡,共聚焦顯微鏡技術檢測胃癌耐藥細胞形態(tài)學的變化;通過流式細胞儀技術檢測化療藥物對親本敏感胃癌細胞和耐藥細胞的細胞周期的影響.并根據(jù)所觀察到的形態(tài)學特征,從63個被差異顯示出的耐藥相關基因中選出6個基因,分別為NPD017、TTC-1、ME3、MRS2L、TBPIP和MAD2.克隆鑒定該六個耐藥相關基因,并進行基因的功能學分析,以探討耐藥相關基因可能的耐藥作用機制.結論:(1).耐藥細胞胞內藥物分布表現(xiàn)為核漿比

2、例逆轉,藥物分布具有內膜系統(tǒng)的特征,提示核漿轉運和胞外分泌途徑參與了胃癌細胞多藥耐藥性的形成.(2).耐藥細胞核膜明顯地不規(guī)則、深陷甚至卷曲.細胞膜之間突觸樣的聯(lián)系增多,并能形成細胞間小管結構.提示耐藥細胞的核膜和核孔的形態(tài)和組成可能發(fā)生了一定的變化,胃癌耐藥細胞可能借助其特有的結構細胞間小管,將蓄積藥物通過胞外分泌和脂質分泌途徑排出體內.(3).阿霉素能將親本細胞SGC7901阻滯在G2/M期,而耐藥細胞不被阻滯在G2/M期.能夠進入

3、下一個細胞周期,細胞周期分布基本上無變化.這提示耐藥細胞能夠克服化療藥物引起的細胞周期阻滯,涉及細胞周期調節(jié)的分子參與了胃癌細胞耐藥性的形成.(4).通過縱向和橫向綜合比較該六個耐藥相關基因,初步得出MAD2β和ME3具有較強的促進胃癌細胞產生多藥耐藥性的作用,MAD2β和ME3基因所導致的耐藥性既能使胃癌細胞對DNA損傷劑MMC和ADR產生一定的抵抗性,也能使胃癌細胞對以微管為靶向的藥物產生一定的抵抗性,具有較廣泛的耐藥譜,提示二者可