貓腰髓年齡相關(guān)的形態(tài)學(xué)變化研究.pdf

1、作為低級反射中樞和興奮傳導(dǎo)通道，脊髓形態(tài)結(jié)構(gòu)的年齡性變化對其反射和傳導(dǎo)功能可能會有重要影響。本文通過對青年貓和老年貓腰髓形態(tài)結(jié)構(gòu)的比較研究，為脊髓生理功能衰退的研究積累基礎(chǔ)形態(tài)學(xué)資料。
　　1.以青年成年貓(1-3齡，2-2.5kg)和老年貓(12齡，3-3.5 kg)L6段脊髓為研究對象，用神經(jīng)絲蛋白(NF)免疫標記神經(jīng)纖維，分別計數(shù)青年組和老年組白質(zhì)各索中神經(jīng)纖維數(shù)，進行統(tǒng)計學(xué)比較分析;透射電鏡觀察腰髓后索的橫斷面超薄切片，分

2、別測量青年組和老年組后索有髓神經(jīng)纖維的纖維直徑和軸突直徑，繪制直徑譜直方圖，并比較兩組個體軸突直徑(d)與纖維直徑(D)的比值。結(jié)果表明，與青年組相比，老年組各索神經(jīng)纖維密度顯著下降(p<0.01)，NF免疫反應(yīng)陽性較弱;老年組有髓神經(jīng)纖維明顯雜亂，髓鞘形狀不規(guī)則，部分神經(jīng)纖維出現(xiàn)髓鞘松解、髓鞘囊泡及髓鞘增生現(xiàn)象。通過神經(jīng)纖維和軸突直徑譜，可見老年組小直徑纖維明顯減少。大直徑纖維中，老年組軸突明顯變細，但神經(jīng)纖維相對變粗。老年組軸突直徑

3、與神經(jīng)纖維直徑的比值(d/D)較青年組小。以上結(jié)果表明，衰老過程中，脊髓白質(zhì)神經(jīng)纖維有明顯丟失現(xiàn)象，軸突萎縮，髓鞘增生，這些變化可能會導(dǎo)致脊髓相應(yīng)部位的傳導(dǎo)能力受影響。
　　2.用改良的Holzer結(jié)晶紫染色顯示所有膠質(zhì)細胞，成年動物Golgi法顯示膠質(zhì)細胞形態(tài)，膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫染色顯示星形膠質(zhì)細胞，光鏡下對青年貓和老年貓腰髓白質(zhì)中膠質(zhì)細胞進行形態(tài)學(xué)觀察和定量研究。與青年貓相比，老年貓腰髓白質(zhì)中膠質(zhì)細胞密度顯著增大

4、(p<0.01)，GFAP免疫陽性(GFAP-IR)細胞密度顯著增大(p<0.01)，GFAP-IR細胞陽性反應(yīng)較強，胞體明顯膨大，突起稠密粗大。表明在衰老過程中，脊髓白質(zhì)有明顯的膠質(zhì)細胞增生現(xiàn)象。提示白質(zhì)中膠質(zhì)細胞的增生可能是對神經(jīng)纖維丟失的補償性增生，從而延緩脊髓的衰老。
　　3.用免疫組織化學(xué)ABC法觀察和比較γ-氨基丁酸(GABA)能神經(jīng)元和5-羥色胺(5-HT)能神經(jīng)元在青年貓和老年貓L6段脊髓中的分布，探討GABA能神

5、經(jīng)元和5-HT能神經(jīng)元在脊髓中分布的年齡相關(guān)變化及意義。(1)GABA免疫染色結(jié)果顯示，青年貓與老年貓L6段脊髓灰質(zhì)內(nèi)，GABA能神經(jīng)元及神經(jīng)纖維分布廣泛，各個Rexed板層均可見GABA-IR細胞，其中背側(cè)灰質(zhì)陽性最強，其次是腹側(cè)灰質(zhì)。標記的GABA胞體為卵圓形、三角形、多角形和星形，可分為大、中、小三種類型。經(jīng)比較，老年組GABA能神經(jīng)元的數(shù)量及免疫反應(yīng)性均明顯低于青年組。提示脊髓中GABA能神經(jīng)元的分布有明顯的年齡相關(guān)變化，并可能

6、對脊髓的調(diào)節(jié)機能有影響。(2)5-HT免疫染色結(jié)果顯示，在青年貓與老年貓L6段脊髓灰質(zhì)中，5-HT能神經(jīng)元與神經(jīng)纖維分布廣泛，多個Rexed板層均可見5-HT陽性神經(jīng)元，主要分布于RexedⅠ、Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ區(qū)。5-HT能神經(jīng)纖維陽性較強的區(qū)域有RexedⅠ、Ⅱ區(qū)及RexedⅦ、Ⅷ區(qū)，RexedⅩ區(qū)未見陽性標記。經(jīng)比較，老年組腰髓中5-HT能神經(jīng)元的數(shù)量及免疫反應(yīng)性均明顯低于青年組。表明貓腰髓中的5-HT表達有明顯的年齡相關(guān)變化，該變化與脊