天然抗癌藥物芫花酯甲及其注射液藥學研究.pdf

1、芫花為中國特有的瑞香科植物，主要有效成分為植物中罕見的瑞香烷型二萜原酸酯類化合物，其中芫花酯甲對多種癌細胞系有較強的抑制活性，對DNA拓撲異構酶I的抑制作用是其抗癌的可能機理。芫花酯甲的化學結構與喜樹堿類完全不同，屬于新結構類型的DNA拓撲異構酶I抑制劑。 本文建立了芫花根中瑞香烷型二萜原酸酯類組分HPLC-UV標準指紋圖譜，對主要色譜峰用LC-MS進行了歸屬，并對其中主要成分建立了定量分析方法，為不同產(chǎn)地、采收季節(jié)和人工栽培等

2、原料藥材的質量控制提供了科學依據(jù)。探討了芫花酯甲提取工藝路線，選用石油醚回流提取，硅膠柱粗分離，制備型C18HPLC純化，分離得到高純度芫花酯甲，收率為0.0143﹪，同時從芫花中首次分離得到芫花酯己。通過UV、IR、MS、1H-NMR、13CNMR和2D-NMR譜對芫花酯甲和芫花酯己進行了結構表征。 本文將芫花酯甲制成自組裝納米膠束水溶性注射液，并對質量分析方法進行了驗證，考察了影響芫花酯甲注射劑穩(wěn)定性的主要因素為pH值，pH

3、在7.0～9.0范圍內(nèi)穩(wěn)定性良好，pH小于6.0時，芫花酯甲原酸酯環(huán)易被酸催化為對DNA拓撲異構酶I無抑制活性的水合開環(huán)產(chǎn)物(m/z666)，這也首次闡明了傳統(tǒng)醋制芫花毒性降低的機理。體外溶血實驗結果表明芫花酯甲注射液無溶血和紅細胞粘集作用，可用于靜脈注射。 芫花酯甲和芫花酯己對人黑色素瘤細胞A375有明顯的抑制活性，IC50分別為5.50和6.90μM，對DNA拓撲異構酶I抑制IC50分別為40.0和38.0μM。藥代動力學初

4、步研究結果表明：芫花酯甲注射液家兔靜脈注射給藥，在體內(nèi)符合雙室開放模型C=2071.1e-0.632t+341.1e-0.0652t，分布相半衰期為1.1h，消除半衰期為10.6h；主要代謝物為芫花酯甲兩個側鏈被同時水解的分解產(chǎn)物(m/z392)，未檢出有芫花酯甲水合開環(huán)產(chǎn)物和C12位酯基被水解產(chǎn)物12-羥基瑞香毒素。尿中主要以上述代謝物形式排泄，而原型藥物僅占0.8﹪，24h后未檢測到原型藥物。預研結果為動物正式藥代動力學和臨床藥代動