甘肅省曲霉菌的RAPD分析和ITS序列分析.pdf

1、從2004年3月開始，分別在甘肅的敦煌、武威、張掖、天祝、蘭州、白銀、定西、天水、武都等地的土樣和昆蟲上采集并分離曲霉菌，發(fā)現甘肅省曲霉資源很豐富，對分離到的曲霉菌進行常規(guī)形態(tài)鑒定和分子鑒定，并探討二者之間的關系。主要結果如下： 1.在曲霉傳統(tǒng)分類鑒定中，由于其種類多、且種間具有較大的相似性，因此根據形態(tài)特征進行分類鑒定具有較大的難度。本研究采用隨機擴增多態(tài)性DNA(RAPD)分析和核糖體(rDNA)內轉錄間隔區(qū)(ITS)序列分

2、析方法對14種曲霉進行分類鑒定與系統(tǒng)發(fā)育研究，以期望能為該屬真菌分子系統(tǒng)學的研究提供新的資料。 2.14個隨機引物對14種曲霉的擴增圖譜中，沒有發(fā)現所有曲霉的共有帶。14個隨機引物擴增得到的211個RAPD位點中，有164個多態(tài)性位點，多態(tài)性位點頻率占77.73﹪，表明了供試菌株間存在著豐富的多態(tài)性。試驗中所用14個引物的RAPD圖譜能夠較客觀地反映出供試菌株間親緣關系的遠近。 3.基于菌株間的相似性系數分析和應用Bet

3、ween-groupslinkage法構建的聚類樹狀圖，顯示出不同的曲霉種間只在較低的相似性系數聚為一類，這與形態(tài)特征分種基本吻合，反映了形態(tài)學分類的分子遺傳本質，同時也表明了應用RAPD技術進行曲霉親緣關系分析的種類鑒定具有合理性和可行性。 4.本研究還選取了部分形態(tài)學上的近似種和疑難種進行ITS序列分析。分別對6個菌株的ITS區(qū)(ITS1和ITS2)及5.8SrDNA進行了序列測定，所有序列經排列并用Mega3.0軟件進行分