Plekhs1在小鼠子宮接受態(tài)轉(zhuǎn)變過程中的表達(dá)與調(diào)節(jié).pdf

1、胚胎著床是妊娠過程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，成功胚胎著床主要取決于三個(gè)因素:胚泡的活化、子宮進(jìn)入接受態(tài)以及活化的胚泡和接受態(tài)子宮之間的相互作用。子宮內(nèi)膜的接受態(tài)主要受卵巢分泌的雌激素和孕酮的調(diào)節(jié)。此外還有一些不受卵巢激素直接調(diào)控的但能調(diào)節(jié)子宮的接受態(tài)的分子，如KLF5是目前研究較為深入的不受卵巢激素調(diào)控的卻在胚胎著床過程中具有重要作用的基因。
　　PH結(jié)構(gòu)域存在于許多信號蛋白和細(xì)胞骨架蛋白中，它能夠介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)外信號的傳遞。Plekhs1是

2、含有PH結(jié)構(gòu)域的蛋白S家族的1號成員。到目前為止無論在生殖領(lǐng)域還是其它生物學(xué)領(lǐng)域均未見其相關(guān)報(bào)道。我們通過基因芯片技術(shù)檢測到Plekhs1在胚胎著床前的子宮中具有較高的表達(dá)量，而著床后的子宮中表達(dá)量明顯下降，因此我們推測該基因與子宮接受態(tài)的轉(zhuǎn)變有關(guān)。
　　本研究利用小鼠早期妊娠模型、假孕模型、類固醇激素處理模型、延遲著床與激活模型、假孕延遲著床與激活模型和輸卵管結(jié)扎模型，結(jié)合定量RT-PCR、原位雜交、免疫組化、Westernbl

3、ot和TALEN技術(shù)，研究了Plekhs1與小鼠子宮接受態(tài)之間的關(guān)系。Plekhs1 mRNA在早期妊娠第1-4天小鼠子宮腔上皮中有較高水平的表達(dá)，在妊娠第3、4天表達(dá)量達(dá)到最高。從妊娠第5天開始直到第8天，Plekhs1 mRNA的表達(dá)量則非常低。Plekhs1蛋白在早期妊娠第1-5天小鼠子宮中有較高水平的表達(dá)，第4、5天表達(dá)較強(qiáng)。Plekhs1 mRNA在假孕第1-5天子宮腔上皮中有較高水平的表達(dá)，在假孕第6、7天的子宮中幾乎沒有表

4、達(dá)，第8天又恢復(fù)表達(dá)。在卵巢切除的小鼠子宮腔上皮、卵巢切除后雌激素處理組、孕酮處理組以及雌激素和孕酮聯(lián)合處理組小鼠子宮腔上皮Plekhs1 mRNA均呈強(qiáng)表達(dá)。在延遲著床的子宮腔上皮中Plekhs1呈強(qiáng)表達(dá)，在延遲著床激活的子宮腔上皮中沒有檢測到Plekhs1的表達(dá)。在假孕延遲著床的子宮腔上皮中Plekhs1呈強(qiáng)表達(dá)，在處于接受態(tài)的假孕延遲著床激活（3ng雌激素24小時(shí)，25ng雌激素7小時(shí)，50ng3小時(shí)）的子宮腔上皮中Plekhs1

5、呈表達(dá)，在處于非接受態(tài)的假孕延遲著床激活（25ng雌激素24小時(shí)，50ng7小時(shí)）的子宮腔上皮中未檢測到Plekhs1表達(dá)。在妊娠第五天雙側(cè)輸卵管結(jié)扎的子宮中仍能檢測到Plekhs1的表達(dá)。在在妊娠第五天單側(cè)輸卵管結(jié)扎的子宮中，結(jié)扎側(cè)子宮腔上皮中仍能檢測到Plekhs1的強(qiáng)表達(dá)，而在未結(jié)扎側(cè)（胚胎發(fā)生著床）的子宮腔上皮中未檢測到Plekhs1的表達(dá)。在子宮著床胚胎數(shù)目稀少的情況下，我們對妊娠第5天非著床位點(diǎn)進(jìn)行了檢測，發(fā)現(xiàn)距離著床位點(diǎn)越