高糖對視網(wǎng)膜色素上皮屏障與轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響.pdf

1、 目的：本研究擬觀察在高糖環(huán)境下RPE的通透性、緊密連接以及主動轉(zhuǎn)運(yùn)功能的改變，以探討視網(wǎng)膜外屏障在糖尿病黃斑水腫中的作用，為探索有效的治療方法提供理論依據(jù)。 方法：1.用ARPE-19細(xì)胞系，培養(yǎng)在Millicell HA濾膜上，建立視網(wǎng)膜外屏障模型。2.用含不同糖濃度(7mmol/L、16mmol/L、30mmol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)ARPE-19細(xì)胞，在不同時間點(diǎn)(1周、2周、3周、4周)測量ARPE-19的跨上皮電阻

2、(TER)與對辣根過氧化物酶(HRP)的通透性。3.RT-PCR檢測在不同糖濃度的培養(yǎng)基中生長的細(xì)胞緊密連接與液體轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)因子occludin、zo-1、N-cadherin、β-catenin、Cx43、Na-K-ATPase α 1、Na-K-ATPase β 1、P2Y2的基因表達(dá)情況。4.Western blot檢測 occludin、β-catenin、Cx43、Na-K-ATPase β的蛋白表達(dá)情況。 結(jié)論:1.高